DuraScribe® T7 Transcription-技术文章-上海起发实验试剂有限公司手机版

DuraScribe® T7 Transcription

时间：2015-03-03 阅读：1331

名称： DuraScribe? T7 Transcription Kit

货号： DS010910

单位： 10 Rxns

DuraScribe? T7 Transcription Kit
The DuraScribe? T7 Transcription Kit试剂盒是一个体外转录试剂盒产生称为DuraScript? RNA的RNA，能够*抵抗RNase A的降解.
The DuraScribe T7 Transcription Kit试剂盒含有DuraScribe T7 RNA聚合酶,该聚合酶是T7RNA聚合酶的Y639F突变体，能够有效将2′-Fluorine-CTP (2′-F-dCTP), 2′-Fluorine-UTP (2′-F-dUTP), ATP 和GTP合成到RNA酶抗性的称为DuraScript RNA的转录本中 (Figure 1). DuraScribe T7 RNA 聚合酶与野生型的T7 RNA聚合酶使用相同的T7启动子。
应用
DuraScript RNA 被证实适用于RNA配体合成，核酶，RNA干扰(RNAi)和反义RNA等研究。
好处

DuraScript RNA能够抵抗RNase A和DNase
高产DuraScript RNA
T7 体外转录反应. DuraScribe DuraScribe T7 RNA 聚合酶与野生型的T7 RNA聚合酶使用相同的T7启动子.
是RNA配体研究的理想选择. 有大量的RNA适配体研究引用DuraScribe Kit试剂盒
SELEX-兼容. DuraScript RNA 可用于SELEX选择过程。
制备长的或短的DuraScript RNA. 带有T7聚合酶启动子的双链寡核苷酸，线性质粒，PCR产物均可被转录.

Table 1.一个DuraScribe? Kit试剂盒反应产生的DuraScript? RNA量。3-Kb 长度的DNA模板被在不同位置打断形成线性化，然后通过DuraScribe T7 Transcription Kit 反应4小时。DuraScript RNA产物量以微克 (μg)和皮摩尔(pmol)显示。

产生的DuraScript RNA的大小	DuraScript RNA的产量 (μg)	DuraScript RNA的产量(pmol)
2600 nts	100 ug	116 pmol
1400 nts	58ug	124 pmol
330 nts	18ug	164 pmol
88 nts	9ug	307 pmol

Figure 1. DuraScribe? T7 RNA聚合酶有效将2′-F-dCTP和2′-F-dUTP嵌入到全长DuraScript? RNA。 2′-F-dC和2′-F-dU核苷2′-位置的氟能够阻止RNase A的降解。

Figure 2. DuraScribe? T7 转录反应的RNA产量. 标准反应(4-6小时)产生40-60 μg的1.4-kb长度的DuraScript? RNA。

Figure 3. DuraScript? RNA抵抗RNase A的降解. 1.4- kb长度的标准RNA转录本和1.4-kb长度的 DuraScript RNA转录本加入1 U的高纯度RNA酶A孵育30分钟。标准的RNA转录本被*降解，而DuraScript RNA转录本仍然完整。Lane M, 分子标记; lane 1, 1.4-kb 标准RNA转录本; lane 2,标准RNA被RNA酶处理后; lane 3, 1.4-kb DuraScript RNA; lane 4, DuraScript RNA 被RNase A处理后。

Figure 4. DuraScript? RNA*抵抗 "手指"核酸酶。使用无菌水和被受试者手指污染的水制备的1.4-kb的标准RNA转录本和1.4-kb的 DuraScript RNA 转录本。标准RNA被手指核酸酶广泛降解，而DuraScript RNA保持完好。M, 分子标尺; Lane 1, 标准RNA 转录本; Lane 2, 手指核酸酶污染后的标准RNA; Lane 3, DuraScript RNA; Lane 4, 手指核酸酶污染后的DuraScript RNA.

Catalog No.	Size

DuraScribe? T7 Transcription Kit
DS010910	10 Reactions
DS010925	25 Reactions
Contents: DuraScribe? T7 Enzyme Mix, RNase-Free DuraScribe? T7 10X Reaction Buffer, ATP, GTP, 2′-F-dCTP, 2′-F-dUTP, DNase I, DTT, Control Template DNA (linearized), Sterile Deionized Water.

DuraScribe? SP6 Transcription Kit
DS041010	10 Reactions
Contents: DuraScribe? SP6 Enzyme Mix, DuraScribe? SP6 10X Reaction Buffer, ATP, GTP, 2′-F-dCTP, 2′-F-dUTP, DNase I, DTT, Control Template DNA (linearized), Sterile Deionized Water.

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