一 目的:严格控制动物实验环境不受病源微生物的危害; 保护动物的福利; 维持屏障环境的生物洁净度;确保动物生产与实验环境的一致性
二 依据:《实验动物管理条例》(中华人民共和国国家科学技术委员会令第2号,1988), 《实验动物环境及设施》(中华人民共和国国家标准,GB 14925-2001) 三、屏障环境的消毒
(一)启用前的消毒 - 清洁屏障环境,检查设施、设备状况。开启空调通风系统自净1周。
- 用 2% 的新洁而灭和 300ppm 的强效消毒剂交替擦拭饲养室、走道、缓冲间、更衣室、风淋室的四壁、顶部、地面,并清洗进出风口。
- 次日用 5% 的碘伏重复擦拭,并用 0.5% 的过氧乙酸喷雾消毒环境。
- 关闭通风系统。
- 用 40% 清水 + 30% 高锰酸钾 + 30% 甲醛熏蒸屏障系统内各区域。
- 请上海实验动物质量检验监督站检测屏障环境各饲养室、走道、缓冲间、更衣室、风淋室的空气落下菌,合格后方可投入使用。
(二)日常消毒 - 每个工作日须用配制好的消毒液随时擦拭每层笼架。
- 结束每次的实验工作后,清洁地面,然后用另一种消毒液擦拭地面。
- 用 0.2% 的过氧乙酸喷雾消毒环境。
- 结束所有工作后,用消毒液擦拭走道、缓冲间地面。
- 每月更换出风口滤材,并用消毒液清洁擦拭进出风口。
四、消毒液的配制与使用(一)0.5% 过氧乙酸的配制与使用 - 把过氧乙酸 A、B 型溶液按 1:0.8 比例混合,放置 24 小时后使用。
- 在盛有 998ml 清水的容器中加入 5ml 过氧乙酸混合液,混合均匀后即成 1000ml 0.5% 的过氧乙酸消毒液。
- 0.5% 过氧乙酸消毒液用于动物屏障系统内擦拭、喷雾消毒。
- 过氧乙酸消毒液须在使用时配制。
(二)2% 新洁尔灭(含苯扎溴铵5%)消毒液的配制与使用 - 取新洁尔灭溶液 400ml,加入 600ml 清水中,混合均匀后即成 1000ml 的 2% 新洁尔灭消毒液。
- 2% 新洁尔灭消毒液用于浸泡、擦拭消毒。
- 新洁尔灭消毒液须在使用时配制。
(三)5% 碘伏液的配制与使用 - 按每 50ml 碘伏加 950ml 清水的比例配制,混合均匀后即成 1000ml 的 5% 碘伏消毒液。
- 5% 碘伏液用于浸泡、擦拭消毒。
- 碘伏液须在使用时配制。
(四)300ppm 强效消毒剂(三氯异氰尿酸,含有效氯 30%)的配制与使用 - 按 1000ml 清水中加入 1g 强效消毒剂的比例,充分溶解,混合均匀后,即成 300ppm 的强效消毒剂。
- 强效消毒剂用于喷雾、浸泡、擦拭消毒。
- 强效消毒剂须在配制 20 分钟后使用。
(五)高锰酸甲+福尔马林消毒剂的配制与使用 - 按 40% 的清水 + 30% 高锰酸甲 + 30% 福尔马林程序配制。
- 高锰酸甲 + 福尔马林消毒剂用于屏障系统内的熏蒸消毒。
(六)消毒液的使用原则 - 按各消毒液的用途,以周为单位交替轮换使用。
- 各消毒剂不能混合配制使用。
- 必须使用产品有效期内的消毒液。
五、笼具架的清洗与消毒- 鼠笼每周至少更换 2 次,笼盖每 2 周更换 1 次,饮水瓶每天更换,饲养笼架每月擦拭消毒 1 次。
- 每批动物实验结束后,必须更换该批动物的笼具、水瓶,用消毒液擦拭笼架、饲养室,喷雾消毒,紫外照射后,进行下一批的动物实验。
- 每次更换后的脏笼具送到走道前端的缓冲区,并关紧门从原路退回。
- 从缓冲区取出脏笼具放置于清洗间的区域;把笼盖先放在盛有消毒液的器具中浸泡,30 分钟后刷洗干净。
- 在清洗池中刷洗水瓶内壁及饮水嘴管;每2周用温水加洗洁精液刷洗饮水瓶、饮水嘴管,并用清水充分冲洗干净。
- 用刮板刮去脏笼内的垫料等污物,在清洗池中刷洗干净笼具内外壁,并用消毒液浸泡30分钟,沥干。垫料等污物用塑料袋包装,集中处理。
六、无菌工作衣的清洗与消毒管理- 进入屏障系统的人员必需穿着无菌工作衣且为一次使用。
- 所有无菌工作衣必须经 121℃、30 分钟高温高压灭菌后使用。
- 经灭菌处理的工作衣放置在内更衣室衣柜内。
- 每次使用后清洗、凉干后放入灭菌盒,交由专业人员灭菌处理。
- 经灭菌处理的无菌衣,如果 2 周没有使用,则应取出重新灭菌后使用。
- 无菌工作衣的使用期限为一年
七、饲料、垫料和饮用水的消毒管理- 检查饲料的生产日期(批号),是否在保质期内,包装是否符合国家标准 GB 14924.1-2001。
- 每批饲料须感官检查,要求新鲜、无杂质、无异味、无霉变、无虫蛀及鼠咬。
- 每批 Co60 饲料的存放期不超过 6 个月,发现包装有破损或漏气应挑出。
- 垫料应选择无刺激味、无毒性、无油脂、无杂质、色泽较白、手感松软、形状均匀、经过筛选的垫料。
- 垫料经 121℃、30min 高温、高压灭菌处理。
- 饮用水为纯水机生产,并经 121℃、30min 高温、高压灭菌处理。
- 动物的瓶装水必须每天更换。
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