9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞

,9LlacZ

货号：YJ-r037（种属鉴定）

价格： 1500.0

规格： 1*10 ⁶

细胞介绍

9L/lacZ细胞株1989年从9L细胞株（大鼠硝基脲诱导的胶质瘤细胞株）发展而来。 用携带E. coli编码beta-半乳糖苷酶lacZ基因和带来G418抗性的Tn5新霉素基因BAG复制缺陷的逆转录病毒载体感染9L细胞株。 细胞在G418存在下培养14天，克隆，并检测beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ产生高水平的酶，选择其进行后续研究。 细胞持续表达lacZ报告基因产物，从E. coli衍生来的beta-半乳糖苷酶，从而可以通过组织切片的组织化学染色来鉴定单个肿瘤细胞。 同一片子上的淋巴细胞和其它响应细胞也可以通过双标记抗体进行鉴定。 染色细胞和背景的对比有益于图像分析。 这是少数允许量化分析的大脑微观肿瘤模型中的一种。 这种肿瘤模仿了人类大脑肿瘤的生长和传播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表达十分稳定，但细胞培养数月后应该重新进行克隆。

一．培养基及培养冻存条件准备：

1) 准备：1640 基础培养基(推荐：YJ-0002)，优质胎牛血清10 %，P/S 1 %

2) 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

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