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植物总酚(TP)含量检测试剂盒说明书

时间:2024-10-22      阅读:57

可见分光光度法

植物总酚(TP)含量检测试剂盒说明书 货号:YJS2309

规格:50T/24S

产品内容:

提取液:60%乙醇, 自备。

试剂一:液体 20mL×1 瓶,4℃保存。

试剂二:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。

标准品:液体 1mL×1 支,4℃保存。1mg/mL 单宁酸标准溶液。

产品说明:

植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而 广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。


在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在 760nm 处有特征吸收峰,测 760nm 处的




吸光值,即可得样品总酚含量。

自备实验用品及仪器:

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1 mL 玻璃比 色皿、蒸馏水。

操作步骤:

一、总酚提取

将样本烘干至恒重,粉碎,过 40 目筛之后,称取约 0. 1g ,加入 2.5mL 提取液,用超声提取法进 行提取,超声功率 300W ,破碎 5s ,间歇 8s 60 , 提取 30min 12000rpm 25 , 离心 10min  取上清,用提取液定容至 2.5mL ,待测。

二、标准品制备

 1mg/mL 单宁酸标准溶液二倍稀释至 0.31250.15620.07810.03910.01950.00980.0049 0.0024 0.0012 0.0006mg/mL ,待测。

三、测定操作表

1 、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 760nm ,蒸馏水调零。

2 、操作表


对照管

测定管

标准管

空白管

样本待测液 ( μL)

50

50


-

标准液 ( μL)



50


蒸馏水 ( μL)




50

试剂一 ( μL)

-

250

250

250

混匀,室温静置 2min

试剂二 ( μL)

250

250

250

250

蒸馏水 ( μL)

700

450

450

450

混匀,室温静置 10 min, 1mL 比色皿,测定 760nm 吸光值。

空白管只测一次。

四、总酚含量计算


1 、标准曲线绘制:

以不同浓度的单宁酸为 轴,ΔA标准-A 空白)为 y  轴绘制标准曲线 y= kx+b

2 、植物总酚含量计算:

ΔA=A 测定-A 对照带入标准曲线,求 x(mg/mL)

(1) 按样本鲜重计算


总酚含量(mg/g  鲜重)= x×V 提取÷W= 2.5x÷W (2) 按样本






蛋白浓度计算


总酚含量(mg/mg prot= x×V 提取÷V 提取×Cpr= x ÷Cpr

提取:提取液体积,2.5 mLCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样品质量g

注意事项:

(1)OD 值大于 1.0 ,样品适当稀释再测定,注意计算公式里乘以稀释倍数。

(2)试剂一对皮肤有一定的刺激性,请操作时做好防护措施。


本产品仅供科学研究使用!请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途

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实验技术服务:




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