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产品名称:人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒
英文名称:Human NT-proBNP ELISA Kit
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N端实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人N端前脑钠素(NT-proBNP)水平。用纯化的人N端前脑钠素(NT-proBNP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入N端前脑钠素(NT-proBNP),再与HRP标记的N端前脑钠素(NT-proBNP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的N端前脑钠素(NT-proBNP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人N端前脑钠素(NT-proBNP)浓度。
样品采集:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。ELISA原理实验条件和技术要点
在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:1,是检测抗体还是抗原?2,检测的结果是定性还是定量?3,是否需要检测特异抗体的类型?4,所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样?
(1)检测抗原 zui常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶抑制剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。
(2)检测抗体 检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的*步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:2-8℃。
2.有效期:6个月
本产品仅供科研使用咨询 “人N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒”产品详细说明书。