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如何对超微量分光光度计进行有效测量

时间:2022-11-12      阅读:929

  超微量分光光度计是精密光学仪器,出厂前经过精细的装配和调试,如果能对仪器进行恰当的维护和保养,不仅能保证仪器的可靠性和稳定性,也可以延长仪器使用寿命。
  设备出现问题的几率并不高,尤其是当设备正常使用和日常维护时,更多的问题可能由外部因素导致,如样品的均质、颗粒物或气泡干扰等。要定期对超微量分光光度计进行测量,这样才能有效避免仪器发生故障问题。
  标准品测量
  常用的标准品可使用BSA或核酸标准品,可从各试剂厂家购买,或使用如BCA定量试剂盒,QUBIT核酸定量试剂盒中的标准品。请注意标准品一定要在效期之内,且保存得当(通常低温)。也可以使用设备厂家提供的小分子化合物标准品,如Implen提供的PHP标准品。标准品是有等级区分的,通常附带有检定证书的标准品,标称浓度会更准确。
  特别指出的是,使用未知浓度的样品,来评估不同设备的测量结果,并以其中一台作为基准,判定另外一台的准确性,是错误的。
  重复性测量
  在缺乏标准品,或标准品由于保存不当状态已存疑时,可使用未知浓度样品做重复性测试。这可以判断设备的稳定性,以排除一些潜在问题,如样品台损坏、样品的非均质,成分干扰等。虽然不能确定准确性误差,但重复性很好的设备,很大几率是没有大问题的。当然,这需要结合您的允差要求,综合考量。
  梯度稀释测量
  使用已知浓度或未知浓度的样品,均可进行梯度稀释测量,以验证设备的线性稳定性。使用设备的标准曲线功能可便捷地完成此项测试,并给出线性回归。当梯度稀释的R2趋近于1,设备的线性可满足广泛的动态范围内的测量要求,同时也可反映设备的良好状态。需要注意的是,梯度稀释时一定要选择定期校准过的,准确性好的移液器,且正确操作。
  基线稳定性测量
  光源和CCD检测器,作为设备的核心组件,其稳定性对于设备而言是非常重要的,而基线测量可以很好地反映这些部件的状态。使用水(或空气)作为空白,并且用水(或空气)作为样品,做多次重复测量,如果吸光值的漂移很小,通常可反映设备的光学系统组件状态正常。
  基线稳定性测量
  光源和CCD检测器,作为设备的核心组件,其稳定性对于设备而言是非常重要的,而基线测量可以很好地反映这些部件的状态。使用水(或空气)作为空白,并且用水(或空气)作为样品,做多次重复测量,如果吸光值的漂移很小,通常可反映设备的光学系统组件状态正常。
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