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冰冻切片包埋剂及使用方法

时间:2012-07-03      阅读:2634

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冰冻切片包埋剂及使用方法

OCT 冰冻切片包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中,

其用途是在冰冻切片时支撑组织,以增加组织的连续性,减少皱折及碎裂。又因OCT 混合物为水溶性,故

在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色。

利用OCT 混合物(opti-mum cutting temperature compound)预先浸润组织,然后再进行恒冷箱切片,

使切片质量得到改善。

目前实验室使用的冰冻切片包埋剂主流产品是日本樱花公司的O.C.T. Compound ,货号:4583118ml/

瓶,质量稳定,研究者比较熟习。

在使用OCT 进行包埋时,对于包埋模具而言,您可以选择厂家已有的产品,也可以根据实际条件利用手

边已有的包埋管、包埋板等;也有心灵手巧的研究者自己利用铜版纸折叠出很漂亮实用的OCT 包埋模具(当

然前提是您的用量要少)。

OCT 包埋剂(SAKURA 产品)包埋流程:

1. 将放在蔗糖溶液中的组织块取出,放入20g L-1 蔗糖与OCT 包埋剂1体积比例混合液中,室温浸

2h

2. 移入OCT 包埋剂中室温浸泡4h,更换新的OCT 包埋剂,室温浸泡6h.

3. 将标本置于托物台,用恒冷箱切片机切片(一般-22℃),片厚10μm,贴于预处理的载玻片上,-20

冰箱保存。

在实际工作中,有研究者发现当包埋的样本体积较大或者冰冻温度要求更低一点时,使用樱花的Oct(货

号:4583)进行包埋往往很难取得理想的包埋结果。当您遇到这样的麻烦时,我们建议您采用另外一种Oc

包埋剂Tissue Freezing Medium,美国TBS 公司生产(货号:72592)。

如果该文对您的学习和研究能有丝毫帮助,我们都会备感欣慰

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