仪器组成

 

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

 

仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

 

光谱范围

 

包括波长范围为400~760nm的可见光区和波长范围为200～400nm的紫外光区。不同的光源都有其的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。

 

钨灯的发射光谱:钨灯光源所发出的400～760nm波长的光谱光通过三棱镜折射后,可得到由红橙，黄绿，蓝靛，紫组成的连续色谱;该色谱可作为可见光分光光度计的光源。

 

氢灯（或氘灯）的发射光谱:氢灯能发出185～400nm波长的光谱可作为紫外光光度计的光源。

 

物质的吸收光谱：

 

如果在光源和棱镜之间放上某种物质的溶液,此时在屏上所显示的光谱已不再是光源的光谱，它出现了几条暗线,即光源发射光谱中某些波长的光因溶液吸收而消失，这种被溶液吸收后的光谱称为该溶液的吸收光谱。

 

不同物质的吸收光谱是不同的.因此根据吸收光谱,可以鉴别溶液中所含的物质。

 

当光线通过某种物质的溶液时透过的光的强度减弱，因为有一部分光在溶液的表面反射或分散，一部分光被组成此溶液的物质所吸收只有一部分光可透过溶液。

 

入射光=反射光+分散光+吸收光+透过光。

 

如果我们用蒸馏水(或组成此溶液的溶剂)作为"空白"去校正反射，分散等因素造成的入射光的损失则：

 

入射光=吸收光十透过光