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THP-1(人单核细胞白血病细胞)系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。
THP-1(人急性单核细胞白血病细胞)是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。
细胞培养信息:
细胞名称:THP-1(人单核细胞白血病细胞)
细胞别称:THP1; THP 1; THPI; THP-1(ATCC); Tohoku Hospital Pediatrics-1
生长特性: 悬浮
培养条件: RPMI-1640+10% FBS
培养环境: 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5%
细胞检测:
实验室分离的人单核细胞白血病(THP-1)细胞经鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
THP-1细胞培养注意事项
● THP-1细胞悬浮圆形生长,偶有小聚团,属于正常现象,无需吹散;
● 圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率;
● 少量细胞附着瓶底属于正常现象,可将悬浮细胞转移至新瓶,丢弃贴壁的细胞;
● THP-1喜欢偏酸环境,培养基呈橘色时可不用换液,补充适量新鲜培养基维持一天再进行换液或传代操作;
● THP-1有密度依赖性,密度低时生长较慢,培养密度维持在30万-100万细胞/mL之间为宜,超过80万细胞/mL即可传代;
● THP-1复苏后恢复较慢,如无特殊情况,复苏后48小时内不对细胞进行操作;
● THP-1生长需要稳定的环境,不频繁拿出培养箱,不频繁离心;
● 培养时瓶子竖立放置(瓶盖朝上),可增加细胞局部密度,促进细胞增殖。
● β-巯基乙醇可以消除活性氧自由基,维持细胞高密度生长。若培养基中不添加β-巯基乙醇,长期培养细胞可能会出现大量贴壁,严重聚团等情况。
细胞到货须知
1. 请客户收到本公司原代细胞产品后,立即对物品包装、细胞培养瓶等拍照,如有疑问或问题,须在24小时内通知本公司,提供照片和书面说明。客户收到非冻存原代细胞后,用75%酒精擦拭瓶身,再将原装的原代细胞瓶放入细胞培养箱内培养,1-4小时后再使用,吸取瓶中培养液,换6ml完Q培养液。注意观察细胞情况,待贴壁率达到90%以上再按传代说明操作。请客户使用T25细胞瓶传代,一瓶传二瓶。
2. 谨记:培养原代细胞前三天,需对原代细胞生长状态进行拍照并注明和标记时间。若原代细胞培养生长存在质量问题,需向本公司提供原代细胞培养生长的照片和书面说明。请客户使用原代细胞第3代以内。原代细胞培养传代过多,可能造成原代细胞的质量问题。
细胞培养
1.顾客收到T25瓶装的细胞如果没长满,建议先放培养箱2-4小时
2.吸去培养液,取部分放入50ml离心管,放置于培养箱(放2-3天,观察是否有污染)
3.加PBS清洗1-2遍,去PBS。加6ml完Q培养基放培养箱继续培养。1-2天换一次液(如果培养液变黄,必须尽快换液)
细胞传代
1.细胞密度到达90%,可以进行传代。
2.吸去培养液,加PBS清洗1-2遍,去PBS。加入0.25%胰酉每1.5ml润洗10秒,
3.加12ml完 Q培养基,吹打均匀,即可分到2个T25培养瓶里。(原代细胞1传2,若顾客使用培养皿或培养孔板,建议先包被)
细胞冻存
1.选择指数生长期的细胞,吸去培养液,加PBS清洗1-2遍。去PBS,加入0.25%胰酉每1.5ml润洗10秒,去胰酉每。将培养瓶放37度培养箱,靠残余胰酉每继续消化细胞直至细胞变圆,拍打瓶侧使细胞脱落。
2.加1-1.5ml成品冻存液(本公司有卖的,无血清低DMSO,无需程序冻存),分装至2ml冻存管里,放-80度冰箱过夜。第二天再转至液氮
细胞复苏
1.从液氮罐取冻存管,冻存管放置37度水浴锅1min,至冻存液融解。
2.在超净台将冻存液吸取至T25培养瓶,再加入10-15ml完Q培养基
3.第二天换6ml完Q培养液即可