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Enzymax
上海乾思生物Enzymax品牌代理专业经营进口胎牛血清、细胞因子、ELISA试剂盒、细胞、抗体、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、其产品吸附均匀,吸附性好,空白值低,孔底透明度高,代做ELISA实验等。完善的库存及供应体系以及高效稳定的纯化技术,保证产品均能现货供应和产品质量的稳定性。
怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件?
ATCC(American Type Culture Collection)收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cells and hybridomas链接,输入细胞名称就可以搜索ATCC的细胞数据库。数据库中有每一种细胞的详细描述,包括细胞的来源,培养和冻存条件,以及相关文献等资料。
如何选用特殊细胞系培养基?
培养某类型细胞没有固定的培养条件。MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样容易生长。总之,*MEM、DMEM做贴壁细胞培养;RPMI1640做悬浮细胞培养;各种目的无血清培养*AIMV培养基(SFM)。
测序实验流程:
1 收集样品
2 相关试剂 总RNA提取试剂TREzol Reagent (RNA提取试剂), M-MLV(cDNA逆转录酶), RNA 纯化试剂, RealqPCR MasterMix (荧光定量PCR预混试剂)。
3 实验仪器 荧光定量PCR仪; PCR仪;低温离心机。
4 总RNA提取
5 cDNA合成 在0.5ml的离心管中加入1µl模板总RNA(1µg/µl); 2µl随机引物(T18, 10pmol/ul);2µl 10mM dNTP mix;加水至15µl体系。混匀后70℃变性RNA 5分钟,冰上速冷1分钟,离心将溶液收集至管底加入6µl 5×PCR buffer;1µl RNaseout;1µl M-MLV RT;加水至30µl体系。PCR仪中反应条件设置 37℃延伸60min,70℃保温15min终止反应。合成好的cDNA置于 -20 ℃保存备用。