倒置荧光显微镜的原理和特点介绍
时间:2020-02-18 阅读:4820
倒置荧光显微镜,是指与一般显微镜相比,其物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,由荧光附件与显微镜有机结合构成的显微镜。
倒置荧光显微镜成像原理介绍:
激发光从物镜向下落射到标本表面,被反射到物镜中并聚集在样品上,样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜,经双色束分离器使激发光和荧光分开而成像。物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。适用于土壤微生物培养实验,具有在培养瓶或培养皿内进行显微观察的特点,可以观察不经染色的透明活体。特别适用于对活体细胞和细胞离体培养等显微观察。
倒置荧光显微镜功能特点:
(1)提供足够能量的能激发出荧光的光源。
(2)有着适应不同物质所需的激发光谱一组滤色片,从光源中选择合适的激发光谱,使析出的光谱与该物质的吸收光谱重合,以期望获得大的荧光。
(3)为获得较弱的荧光图像,还要建立一套截止滤色片,它使所需观察的荧光进入系统成像,而将其余的光波,包括发射光阻挡在外,用来提高图像的衬度。
(4)放大的光学系统应适应荧光的特性,终获得既能观察又能摄影的高亮度、高分辨力的良好衬度 的荧光图像。
(5)照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上。
(6)光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜。