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荧光滤光片荧光激发块怎么选?工艺和波段很重要

时间:2021-11-20      阅读:3503

荧光滤光片又叫荧光激发块,是保证荧光显微镜荧光观察效果的重要部件,里面包含激发滤光片、二向分光镜和发射滤光片,好的荧光滤光片能精准过滤杂散光,让荧光成像更加纯净清晰,镀膜技术对荧光滤光片效率影响很大,好的荧光滤光片能高效通光,让荧光观察更高效率,明美采用进口高效滤光片组成荧光激发块,通光效率和成像效果均十分出色。


明美提供UBGY等常规荧光激发块,还针对部分应用场景特别定制了几款特殊高品质定制荧光激发块。

1)宝蓝B2:EX:450/50;DM:485;EM:495LP;为肺结核检测优化定制;

2)紫色V:EX:405/30;DM:440;EM:450LP;为体视紫色及其他荧光附件优化定制;

3)黄色G2:EX:560/40;DM:600;EM:610LP;升级的Y通道方案;

4)红色R:EX:620/50;DM:655;EM:692/45;为CY5等近红外染料优化定制;

5)双通B/G:EX:470/40&575/35;EM:525/40&625/60;为FISH荧光杂交检测项目优化;


凭什么认定一款滤光片激发块是好产品呢?主要有以下几个指标:

1. 低杂散光:和荧光染料的激发峰、发射峰匹配,且交叠小。

2. 低噪声:截止深度深

3. 低干扰:自发荧光小

4. 高质量镜面:透镜面形好,利于荧光成像的提取。如果透镜表面的平整度不好,则会产生波前扭矩或楔角,波前扭矩会改变聚焦或成像位置,一般透射波前扭矩(TWD)比反射波前扭矩(RWD)对成像的影响更加直接,也会有更严格的要求。


从制作工艺技术分析,荧光滤光片一般采用单片无色透明的玻璃作为基底,在玻璃的两个表面镀膜,来控制不同波段的通过(增透)或者拦截(反射)。增反膜的厚度会选择为半波长的整数倍,此时反射叠加增强;增透膜的厚度为1/4 波长的倍数,此时投射叠加增强。


荧光滤光片在实际应用中一般都是以滤光片组(激发块)的形式来使用的。荧光滤光片组一般由三个透镜组成:激发滤光片(EX)、二向分光镜(DM)和发射滤光片(EM),他们都安装于滤光片盒中(Cube),具体结构如图所示


激光滤光片的作用是使激发光能够有效的通过,而避免外界荧光波段的光线进入激发块,二向分光镜顾名思义主要是分光,反射激发光使其照射样品,同时又能够让样品产生的荧光通过,到达发射滤光片,发射滤光片的作用是进一步滤掉激发光和其它杂散光,使系统得到比较纯粹的荧光信号。

对于应用要求较低、预算有限的快速荧光检测等需求,我司可根据客户波段需求,定制匹配相应波段参数的荧光激发块,采用国产荧光滤光片,物有所值,效果理想。

对于科研级荧光观察和光学研究等需求,我司也提供OMEGA/CHROMA等高品质进口滤光片组成的激发块供选择,可以适配尼康、奥林巴斯、徕卡、蔡司等各类品牌显微镜。美国OMEGA 光学公司是设计及生产高性能荧光显微学用光学干涉滤光片的专业厂家,具有广泛的、为特定荧光染料专用的滤光片组合,适用于单个和多个标识显微学应用,包括GFP、FRET、多光子、量子点、Pinkel、对比影像和其它技术。


我们提供丰富的滤光片产品选择,从光谱测定用的频带滤光片,到荧光发射、电视和摄影颜色分离用的长/短通道滤光片,再到荧光显微镜上二向色分光镜、激光滤光片、解析滤光片。


另有sCMOS科研级相机、高精度电动载物台、超长寿命LED固态光源、图像分析软件等科研级显微镜相关软硬件产品


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