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胎牛血清的冻存和复苏的过程详解

时间:2024-05-22      阅读:356

  胎牛血清是一种常用的细胞培养添加剂,它提供细胞生长必需的营养物质、生长因子和附着因子。为了确保FBS的长期保存和使用效果,正确的冻存和复苏操作至关重要。以下是关于胎牛血清冻存和复苏的详细描述:
  1. 胎牛血清的接收与检查:
  - 在接收新的FBS时,应检查外包装是否完好无损,以确保无菌条件。
  - 确认血清的生产日期、有效期和批次号,以便追溯和质量控制。
  2. 冻存前的准备工作:
  - 在冻存前,FBS应存放在2-8°C的冰箱中,避免反复冻融,因为这会影响血清中的蛋白质和其他成分的稳定性。
  - 准备适量的无菌冻存管或瓶子,并确保它们的密封性能良好。
  3. 分装与标记:
  - 根据使用需求,将FBS分装到准备好的冻存管中,避免一次性解冻大量血清,以减少反复冻融对血清质量的影响。
  - 在每个冻存管上清晰标记血清的批次号、分装日期和有效期,以便使用时能够追溯。
  4. 冻存方法:
  - 将分装好的FBS放入-20°C冰箱中预冻数小时,然后转移到-80°C超低温冰箱或液氮罐中长期保存。
  - 确保冻存过程中温度的逐渐降低,避免快速冷冻导致的血清成分变性。
  5. 复苏(解冻)步骤:
  - 在使用FBS前,将其从冻存环境中取出,并在2-8°C的冰箱中缓慢解冻,通常需要过夜。
  - 避免在室温下长时间放置,以防细菌污染和血清成分的变化。
  - 也可以将冻存管置于37°C水浴中快速解冻,但需注意防止水浴的污染。
  6 使用与再冻存
  - 解冻后的FBS应在解冻当天使用,以保证其生物活性和营养成分的完整性。
  - 如果一次未使用完,可以将剩余的FBS重新冻存,但应注意避免反复冻融,因为这会降低血清的质量。
  7. 注意事项:
  - 在整个冻存和复苏过程中,应严格遵守无菌操作规程,以防止微生物污染。
  - 使用无菌的移液工具和容器,避免交叉污染。
  - 定期检查冻存设备的温度记录,确保冻存环境稳定。
  8质量控制:
  - 在使用新批次的FBS之前,建议进行小规模的细胞培养试验,以评估血清的质量和适用性。
  - 记录每次冻存和复苏的详细信息,包括日期、时间和使用情况,以便在出现问题时进行追溯。
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