上海抚生实业有限公司

化工仪器网初级13

收藏

荧光-PCR法原理与技术原理

时间:2021-02-25      阅读:2173

荧光-PCR法原理:

所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

荧光-PCR法技术原理:

将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度,求得Ct值,同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照,即可得出待测标本目的基因的拷贝数。

荧光-PCR法服务流程:

1.客户认真写好订单,提供待检基因相关信息;

2.签订技术服务合同,支付预付款(30-50%);

3.设计合成定量PCR引物(或客户提供文献引物委托本公司合成);

4.DNA/RNA的抽提、定量、RNA反转录;

5.PCR预实验,主要检测引物的特异性和扩增效率;

6.正式定量实验:对所有样品上机检测;

7.实验结果和数据分析,形成报告。

上一篇: 菌株原理及保存方法 下一篇: PCR检测试剂盒技术原理步骤
提示

请选择您要拨打的电话: