酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯yi烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。它是应用最多的一种免疫酶技术。ELISA试剂盒（ELISAKits）已成为药物和植物病理学研究中的常用诊断工具，是检测组织提取液、血清和细胞培养液中目标抗体/抗原的理想工具，也是重要的质量控制手段。

   通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第一步，下面介绍一下血清样本的处理方法。血清是常用于ELISA检测的一类样本，处理也比较简单。

   用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本，将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。（最好将试管或离心管倾斜放置，使液面横截面增大，能使血清更大程度的析出。）4℃ 1000×g离心20分钟，仔细收集上清。建议将血清分装多份，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。

   采血过程中应避免溶血，因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质，在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色，而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染，因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。

ELISA 实验中血清的采集、处理和保存：

1、真空采血针采集 2ml 新鲜血液，加入无菌试管中；

2、采血后室温静置 1 小时；

3、将采集血液用离心机 4℃，2500rpm 离心 10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存 24-48 小时；

-20℃下，可放置保存 1 个月；

-70℃下，可放置保存 6 个月；

5、根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种 ELISA 测定。

大部分 ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以 HRP 为标记的 ELISA 测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染，因为菌体中可能含有含有内源性 HRP，也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜 时检测。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，间接法 ELISA 中可使本底加深。