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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 8号染色体开放阅读框31抗体 |
英文名称 | C8orf31 |
规格 | 0.2ml |
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
盐甜菜标准品 规格:200mg 英文名称:Betaine Hydrochloride
克沙标准品 规格:100mg 英文名称:Ioxaglic Acid
噻嗪标准品 规格:200mg 英文名称:Chlorothiazide
双氢噻嗪标准品 规格:200mg 英文名称:Hydrochlorothiazide
依莰舒相关物质A标准品 规格:50mg 英文名称:Ecamsule Related Compound A
标准品 规格:200mg 英文名称:Lindane
木糖标准品 规格:1g 英文名称:Xylose
生物素标准品 规格:200mg 英文名称:Biotin
酒石布托诺诺标准品 规格:500mg 英文名称:Butorphal Tartrate CIV
扁桃乌标准品 规格:200mg 英文名称:Methenamine Mandelate
L异白 进口、国产 LIsoleucine 含量:BR,99%
L异亮酯盐盐 进口、国产 HIleOMe.HCl 含量:特纯,98.0%
L异木糖 进口、国产 L(+)Lyxose 含量:专业级,70%
L正白 进口、国产 Lrleucine 含量:BR,99%
L组酯二氫物 进口、国产 LHistidinemethylesterdihydrochloride 含量:BR,98%
MAYER氏粘液素卡红 进口、国产 Mucicarmine 含量:高纯,96%
MMLV逆转录酶 进口、国产 MMLVReversetranscriptase 含量:USP级,1000u/mg
N(1基基)2酰 进口、国产 NIPAM 含量:CP,2040目
N(2基)亚基二醋 进口、国产 ADA 含量:络合指示剂
N(2基)亚基二二盐 进口、国产 ADA2Na 含量:AR,99%
8号染色体开放阅读框31抗体15mg手套 一次性无(腈)防护手套 10盒/箱 大号 国产951-78-06871-44-996TIgE-Fc受体Ⅰ(FcεRⅠ)HPLC≥98%CD68分子检测试剂盒100mg15-LOX15144-89-8化学试剂L-型电压依赖性钙离子通道α1D亚(CACNα1D)15mg手套 一次性无(腈)防护手套 10盒/箱 小号 国产951-78-0128255-08-396TIgE-Fc片段受体Ⅱ(FcεRⅡ)HPLC≥98%CD63分子检测试剂盒20mgGLS5144-89-8化学试剂L-型电压依赖钙离子通道α1F亚(CACNα1F)
15mg手套 一次性无(腈)防护手套 10盒/箱 小号 国产951-78-0128255-08-396TIgE-Fc片段受体Ⅱ(FcεRⅡ)HPLC≥98%CD63分子检测试剂盒20mgGLS5144-89-8化学试剂L-型电压依赖钙离子通道α1F亚(CACNα1F)15mg手套 一次性无(腈)防护手套 10盒/箱 中号 国产42155-08-8128255-16-396T细胞附着蛋白2(CYTH2)HPLC≥98%CD5分子样蛋白检测试剂盒20mgβ-LG5144-89-8化学试剂N-型电压依赖钙离子通道α1B亚(CACNα1B)
15mg手套 一次性无(腈)防护手套 10盒/箱 中号 国产42155-08-8128255-16-396T细胞附着蛋白2(CYTH2)HPLC≥98%CD5分子样蛋白检测试剂盒20mgβ-LG5144-89-8化学试剂N-型电压依赖钙离子通道α1B亚(CACNα1B)50mg手套 胶手套 进口 100只/盒 20盒/箱 小号 马来西亚42155-08-8118024-26-396T单核细胞巨噬细胞分化关联蛋白(MMA)HPLC≥98%CD5分子检测试剂盒20mgCSN3829-86-5化学试剂R-型电压依赖钙离子通道α1E亚(CACNα1E)
50mg手套 胶手套 进口 100只/盒 20盒/箱 小号 马来西亚42155-08-8118024-26-396T单核细胞巨噬细胞分化关联蛋白(MMA)HPLC≥98%CD5分子检测试剂盒20mgCSN3829-86-5化学试剂R-型电压依赖钙离子通道α1E亚(CACNα1E)50mg手套 胶手套 进口 100只/盒 20盒/箱 中号 马来西亚42155-08-879995-67-896T脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)HPLC≥98%CD4分子检测试剂盒100mgSM3829-86-5化学试剂T-型电压依赖钙离子通道α1H亚(CACNα1H)
50mg手套 胶手套 进口 100只/盒 20盒/箱 中号 马来西亚42155-08-879995-67-896T脂酰肌醇蛋白聚糖2(GPC2)HPLC≥98%CD4分子检测试剂盒100mgSM3829-86-5化学试剂T-型电压依赖钙离子通道α1H亚(CACNα1H)25mg手套 胶手套 进口 100只/盒 20盒/箱 大号 马来西亚102814-08-4172617-99-196T整合素β2(ITGβ2)98%CD45分子检测试剂盒100mgGL3829-86-5化学试剂端粒重复结合子2(TERF2)