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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321227 |
商品介绍:
测定意义: THL(EC 3.2.1.28)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。海藻糖酶主要功能在于生物体分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供应。 测定原理: 采用3.5-二硝基水杨酸法测定THL催化海藻糖产生的还原糖的含量。还原糖与3.5-二硝基水杨酸共热生成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比,由此判断THL活性的高低。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
发酵冬虫夏草菌粉(标准品)英文名: Sotalol HCl磷化活化蛋白激B抗体包装1g
法筚枝苷英文名: H-89 2HCl磷化活化蛋白激B抗体包装5g
法林二英文名: Fusidine磷化组蛋白去基化JMJD2B抗体包装1g
番茄苷英文名: Fusidine丝裂原活化蛋白激相互作用蛋白2抗体包装25g
番茄红(标准品)英文名: 3-Iodo-L-tyrosine丝裂原活化蛋白激相互作用蛋白3抗体包装5g
番茄碱(标准品)英文名: Dess-Martin periodinane磷化基末端激1/2/3抗体包装1g
番石榴苷(标准品)英文名: Cidofovir磷化蛋白质酪激JAK-1抗体包装25g
番石榴叶(标准品)英文名: 5-Amino-4-imidazolecarboxamide基末端激2抗体包装5g
番泻苷A(标准品)英文名: AGM-1470 连接介导调节蛋白抗体包装5MG
番泻苷B(标准品)英文名: Sodium taurolithocholate基末端激3抗体包装50MG
番泻苷C(标准品)英文名: glycochenodeoxycholic acid (GCDCA)磷化活化蛋白激B抗体包装100g
番泻苷D(标准品)英文名: Sodium taurohyodeoxycholate hydrateJmjC结构域组蛋白去基化H3-K36抗体包装500g
番泻叶(标准品)英文名: Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts)组蛋白去基化JARID2抗体包装5g
翻白草(标准品)英文名: ValinomycinJAK和微管相互作用蛋白2抗体(JAK和微管相互作用蛋白2)包装100g
反式茴香脑英文名: 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole活化蛋白激B抗体包装25g
隔指孢Dactylella│sp. 质量规格:>99%,BR抗着丝点抗体试剂盒甘草二;Dipotassium gl
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:含量≥99.0%(HPLC)抗转谷酰抗体试剂盒戈米辛J;Gomisin J
孟氏假单胞菌Pseudomonas│mandelii 质量规格:HPLC≥99.0%,标准品抗转谷酰抗体试剂盒瓜;L(+)-Citrulline
海藻糖酶测试盒100管/48样黑曲霉 2-羟基-4-甲基嘧啶盐酸盐蓝莓休克病Elisa
酿酒酵母 2-氨基苄NADH脱氢Elisa
燕麦镰孢 2-氨基苯乙线条病Elisa
酿酒酵母 草酸锂蓝莓枯焦病Elisa
厚环乳牛肝 4'-酮蓝莓带化病Elisa
拜耳接合酵母 3-甲基四氢苯酐蓝莓叶条纹病Elisa
米根霉 吡啶-4-烯酸草莓潜隐环斑病Elisa
多育曲霉 2-溴番茄环斑病Elisa
布鲁氏 生物Ⅰ型 4-溴-2-环斑病Elisa
香菇 2-溴对苯二花叶病Elisa
假单胞 2-甲基环已酸Elisa
约氏乳杆 四甲基碳酸氢P选择Elisa
产单核李氏杆 6,7-二氢-5H-环戊烷并[b]吡啶莽草酸脱氢Elisa
平菇 3-硝基-4-酪解氨Elisa
灰葡萄孢 酸-1-异丁酯磷酸甘油酸激Elisa