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具体步骤：
1. 在无菌条件下的冰上对新鲜离体的肿瘤组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；
2. 加入2mmol 的 EDTA，摇匀后放置冰上约 30-60min；
3. 离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期间，置于37°培养箱。每15min摇晃一次，消化时间根据肿瘤组织来定，约1-2h；
5. 待大部分组织块消化成透明状时，用 40μm 的细胞滤网过滤细胞，收集；
6. 用培养基重悬，置于培养箱培养。
一、细胞基本属性 | |
细胞名称 | 兔食管上皮细胞 |
组织来源 | 正常食管组织 |
商品货号 | A01X2045 |
种属来源 | 兔 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 食管可分为颈段、胸段和腹段。脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。 在发育过程中，食管的上皮细胞增殖，由单层变为复层，食管使管腔变狭窄，甚至一度闭锁，以后管腔又重新出现。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，黏膜层，包括上皮、固有层和黏膜肌层。上皮为较厚的未角化的复层扁平上皮，耐摩擦，有保护作用。在食管与胃贲门交界处，复层扁平上皮突然变成单层柱状上皮。 |
包被条件 | |
培养基 | 原代上皮细胞培养体系 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 铺路石状，不规则细胞 |
传代特性 | 根据细胞特性 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% |
注意事项：
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通。
原代细胞培养：
原代细胞（Primary cells）：是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指：组织器官、外周血及胚胎等。
原代细胞培养：由于原代细胞生长缓慢，繁殖一定的代数停止生长（一般10代以内）。所以一般认为：培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统称为原代细胞培养。
公司产品仅供科研研究实验
公司正在出售的产品：
小鼠B细胞杂交瘤细胞；W6/32 | Differentia Reinforced Clostridial Agar |
人肺腺癌细胞；SPC-A1 | 强化梭菌琼脂 |
人滑膜肉瘤细胞；SW982 | Reinforced Clostridium Agar |
非洲绿猴肾细胞；VeroE6 | 强化梭菌培养基（RCM） |
杂交瘤（B类）；Z51B3C10H12A12G2F7B5 | Reinforced Clostridium Medium |
人结直肠腺癌细胞；NCI-H716 | TSN琼脂 |
人T淋巴细胞白血病细胞；HuT78 | TSN Agar |
人乳腺癌细胞；ZR-75-30[ZR7530] | TBB培养基 |
人结直肠腺癌细胞；SK-CO-1 | Tyrobutyricum Broth Base |
小鼠肺泡巨噬细胞；MH-S | CHO培养基基础 |
小鼠淋巴结血管上皮细胞；2F-2B | CHO Medium Base |
大鼠骨髓瘤细胞；Y3-Ag1.2.3 | SCHAEDLER琼脂 |
人急性淋巴细胞白血病细胞；CEM/C1 | 兔食管上皮细胞SCHAEDLER AGAR |
人视网膜母细胞瘤；WERI-Rb-1 | 厌氧菌琼脂 |
大鼠骨肉瘤细胞；UMR-106 | Anaerobic Agar |
