冻存细胞需要程序降温仪

 程序冷冻仪是一种温变速率可调的程序控制冷冻系统，广泛应用于轻工、农、医、基础生物研究等各个领域中，用于淋巴细胞、组织库、骨髓细胞、肿瘤细胞，动、植物细胞、心肌细胞等的冻存。如何用好程序降温仪，让珍贵的免疫细胞，干细胞安全降温，保持活性？

低温生物学，生物体内水的形态变化：

在0℃到零下60 ℃温度范围内，细胞内生命活动较活跃，且六角形冰晶会严重损伤细胞膜、细胞器。

在零下80 ℃到零下100 ℃温度范围内，细胞内生命活动显著降低，细胞内会形成方形的冰块，对细胞膜、细胞器损伤减弱。

在零下130 ℃为水的玻璃化温度，在此温度以下，细胞内水结为不定形冰，几乎不伤害组织细胞膜结构，且细胞内生命活动几乎*停止。

细胞降温过程中，降温速率过快/过慢都会对细胞造成损伤以致影响复苏活性，降温过快-细胞内水迅速结晶，对细胞造成冰晶伤害；降温过慢-细胞壁内外产生渗透压，造成细胞脱水。降温的不同阶段，采用不同的降温速率，可有效减少细胞损伤，提高复苏率。

活细胞降温方法

1、“经典"次序降温: +4°C > -20°C十-80C >长期

2、直接放入液氮

3、玻璃化降温技术

以上三种方法，复苏后成活率高，但是很难规模化；适用于大体积组胞

4、程序降温仪:适用于原代细胞，对温度变化高度敏感的细胞降温

使用程序降温仪的原因

提高样品活性和复苏率；

过程控制，消除批次实验中的变数；

样品保存时间久>10年；

降温曲线可记录存档。

目前市面上常用的程序降温仪工作原理是，通过微处理器控制系统和电磁阀，控制喷入腔体中的液氮量来控制降温速率。其优点是：控温，受外界环境影响小。尤其是处理大体积样本时，快速喷入的大量液氮更易带走样本中的潜热，从而快速降温，保证更好的样本复苏活性。

程序降温仪是通过控制喷入腔体中的液氮量来控制降温速率。一般为先慢冻，后快冻。我们的程序降温仪主要有六种程序内容，包括2ml冻存管、96孔板、麦管、65-100ml造血干细胞(一)、65-100ml造血干细胞(二)、皮肤组织。这些内容都是经过很多相关方面的专家、教授一起通过实验研究得出的。

程序降温仪的优势：

最新聚氨酯发泡技术，保温性能好；

侧开门设计，存取样品更方便；

高精度PID控制算法，控温更精确；

能够提高样品的活性和复苏率；

通过上位机软件，可以数据连接电脑显示以及实时打印；

冻存过程实时记录，井可追溯和打印

CX系列智能程序降温仪是我公司开发研制成功的智能型冷冻仪。该仪器采用微机控制技术，专用软件，能较准确地控制液氮的施放量，从而保证被冻存的生物制品以适宜的冷冻速率降温冷冻。该仪器具有操作简便、人机界面清楚。

我国临床低温医学工作发展迅速，促进了移植医学的发展，特别是在骨髓、造血干细胞、皮肤、角膜、内分泌腺体、以及血管和瓣膜等的冷冻保存和移植应用取得了显著成绩。成功的造血干细胞移植依赖于造血干细胞活力的保存。

生物样品在降温冷冻过程中，当由液态向固态变化的相变期内会释放一定热量，使其温度回升，不控制降温速率的冷冻过程将会导致组织细胞死亡。准确地测定生物样品的相变点，用微机编制降温程序，以便在样品相变时加大液氮输入量，克服相变样品温度的回升，使细胞安全而迅速地度过相变期，这是提高被冻样品成活率的关键环节。