A101D细胞株复苏失败原因分析

慧颖生物作为国内几大生物试剂供应商，提供产品种类多，囊括：检测试剂、图像光学、免疫检测、生物器材、原料试剂、检验医技、抗原抗体、家用医疗、消耗材料、检测治疗、生物耗材等，公司坐落于上海众仁路399号运通星财富广场，公司交通便利，环境优雅，慧颖生物几十名员工，热烈欢迎您的参观指导

产品名称：A101D细胞

中文名称：人乳腺癌细胞

种属：人

来源：乳腺导管癌；女性

培养条件：EMEM/1640

生长状态：贴壁

A101D细胞株复苏失败原因分析

其他细胞培养用液

在细胞培养过程中，除了培养基外，还经常用到一些平衡盐溶液、消化液、pH调整液等。

一、平衡盐溶液（balanced  salt  solution,BSS）：主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。zui简单的BSS是Ringer。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2  的培养条件，Hank's平衡液仅含有0.35g/L  NaHCO3，不能用于5%CO2的环境，若放入CO2培养相，溶液将迅速变酸，使用时应注意。

配制溶液应使用双蒸水或去离子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，应当首先溶解这些成分。配好的平衡盐溶液可以过滤除菌或高温灭菌。

A101D细胞株复苏失败原因分析

EVSA-T                                           人乳腺癌细胞         人     乳腺癌；腹水转移；女性     DMEM     贴壁

BT-483                                           人乳腺导管癌细胞         人     乳腺导管癌；女性         DMEM     贴壁

MDA-MB-435                              人乳腺癌细胞         人     乳腺癌     DMEM     贴壁

MDA-MB-157                              人乳腺癌细胞         人     乳腺癌；胸腔积液转移；女性     L15   贴壁

SW1417                                         人结肠癌细胞         人     结肠癌；女性         L15   贴壁

MH-S                                              小鼠肺泡巨噬细胞         小鼠         巨噬细胞；雄性；SV40转化；BALB/cJ       1640         悬浮

L2                                                    大鼠肺泡上皮细胞         大鼠         肺泡；上皮细胞     DMEM     贴壁

KBM7                                             人慢性髓白血病细胞细胞     人     慢性髓原白血病；男性         IMDM      悬浮

SUM149PT                                   人乳腺癌细胞         人     乳腺癌；女性         DMEM     贴壁

FL83B                                             小鼠正常肝细胞     小鼠         肝；自发永生；C57BL/6J      DMEM     贴壁

PL45                                               人胰腺导管癌细胞         人     胰腺导管癌；男性         DMEM     贴壁

MPC5                                             小鼠肾足细胞         小鼠         肾足细胞；SV40转化    DMEM     贴壁

HUVSMC                                       人脐静脉平滑肌细胞     人     脐静脉平滑肌         DMEM     贴壁

Htori-3                                           人正常甲状腺细胞         人     甲状腺；SV40转化；女性    F12K          贴壁

TPC1                                              人甲状腺癌细胞     人     甲状腺乳头状癌；女性         L15   贴壁

C28/I2                                            人正常软骨细胞     人     软骨；SV40转化；女性        DMEM     贴壁

hADSCs                                         人脂肪间充质干细胞     人     脂肪间充质干细胞         DMEM     贴壁

M059K                                           人胶质瘤细胞         人     胶质瘤；男性         EMEM      贴壁

C1498                                            小鼠白血病细胞     小鼠         白血病；雌性；C57BL/6J      DMEM     悬浮

SNU878                                         人肝癌细胞     人     肝癌；女性     1640         贴壁

SNU886                                         人肝癌细胞     人     肝癌；男性     1640         贴壁

NCI-H1417                                   人小细胞肺癌细胞         人     小细胞肺癌；女性         1640         贴壁

HNSC                                             人神经干细胞         人     神经干细胞     DMEM     贴壁

2BS                                                 人胚肺成纤维细胞         人     胚肺；成纤维细胞；女性     DMEM     贴壁

HIBEpiC                                         人肝内胆管上皮细胞     人     肝内胆管；上皮细胞     1640         贴壁

hUC-MSC                                      人脐带间充质干细胞     人     脐带；间充质干细胞     DMEM     贴壁

MBT-2                                            小鼠膀胱癌细胞     小鼠         膀胱移行细胞癌；C3H/He    1640         贴壁

32DClone3                                   小鼠骨髓淋巴母细胞     小鼠         骨髓淋巴瘤；C3H/HeJ  DMEM     贴壁

A-72                                               犬癌细胞         犬     癌细胞；金毛猎犬         1640         贴壁

MIHA                                             正常人肝细胞         人     肝     1640         贴壁

IR983F                                           大鼠骨髓瘤细胞     大鼠         骨髓瘤     IMDM      悬浮

SF9                                                  昆虫卵巢细胞         昆虫         卵巢；自发永生；雌性         Grace's Ins       悬浮+贴壁

Ishikawa                                       人子宫内膜癌细胞         人     内膜腺癌；女性     1640         贴壁

HCEC                                             人角膜上皮细胞     人     角膜；上皮细胞     1640         贴壁

HCC1500                                      人乳腺管癌细胞     人     乳腺管癌；女性     DMEM     贴壁

Th17                                               小鼠辅助性T细胞          小鼠         辅助性T细胞          1640         悬浮

消化液：取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有时也用胶原酶（collagenase）溶液。

1、胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度，配制时要用不含Ca2+    、Mg2+及血清的平衡盐溶液（如前面的D-Hank's），因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH是8-9，配制胰酶溶液应将液体调至pH8左右，充分溶解，过滤除菌。过滤后可以再调只pH7.5，也可不调。

使用细胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的细胞清洗液（100ml细胞清洗液加0.5g胰酶），过滤除菌，分装于4度保存。

2、EDTA溶液：EDTA溶液也常用来解离细胞，它的作用机制是破坏细胞间的连接。对于一些贴壁特别牢固的细胞，还可以用EDTA和胰酶的混合液进行消化。EDTA溶液的使用浓度为0.02%，配制时应加碱助溶，配制后可过滤除菌，也可高温消毒灭菌。

3、胶原酶溶液：胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用，胶原酶作用的对象是胶原组织，因此不容易对细胞产生损伤。胶原酶的使用浓度为0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH为6.5。胶原酶不受Ca2+ 、Mg2+及血清的抑制，配制时可用PBS。

A101D细胞株复苏失败原因分析