慧颖提供CAL-51细胞CAL-51细胞，中文名称：人乳腺癌细胞，来源：美国DSMZ，活力好，状态好，复苏周期1-2周，*！

General information

Cell line:  CAL-51细胞

Species:  human (Homo sapiens)

Cell type:  breast carcinoma

Origin:  established from the pleural effusion metastasis of a 45-year-old woman with

progressive breast adenocarcinoma (after radio-, chemotherapy and surgery) in

1985; rare example of tumor cell line with normal karyotype

Reference(s):  14563

Biosafety level:  1

Permissions and A

restrictions:

Cell Culture Data

Morphology:  epithelial-like adherent cells growing in monolayers; the culture contains

usually a large amount of cell debris; image; image

Medium:  80% Dulbecco's MEM (4.5 g/L glucose) + 20% h.i. FBS

Subculture:  split culture 1:2 once or twice a week using trypsin/EDTA before cells reach

complete confluency; seed out at ca. 3 x 10 6 cells/175 cm 2

Incubation:  at 37 °C with 10% CO2

Doubling time:  >60 hours

Harvest:  cell harvest of ca. 15-20 x 10 6 cells/80 cm 2

Storage:  frozen with 70% medium, 20% FBS, 10% DMSO at about 2.5 x10 6 cells/ampoule

Scientific Data

Mycoplasma:  negative in DAPI, microbiological culture, RNA hybridization assays

Immunology:  cytokeratin  +,  cytokeratin-7  -,  cytokeratin-8  +,  cytokeratin-17  -,

cytokeratin-18 +, cytokeratin-19 +, desmin -, endothel -, EpCAM +, GFAP -,

neurofilament -, vimentin +

Fingerprint:  multiplex PCR of minisatellite markers revealed a unique DNA profile

Species:  confirmed as human with IEF of AST, LDH, NP

Cytogenetics:  human near-diploid karyotype with 28% tetraploidy - 46<2n>XX, no

consistent abnormality detected - rare example of tumor cell line with normal

karyotype - resembles published karyotype

Viruses:  ELISA: reverse transcriptase negative; PCR: EBV -, HBV -, HCV -, HHV-8 -,

HIV -, HTLV-I/II -, SMRV -

CAL-51细胞CAL-51细胞培养步骤：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL*培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1、对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的*培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞，*脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

2、对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，进行离心收集，1000RPM条件下离心8-10分钟，去除上清，按冻存数量加入血清及DMSO，冻存比例为90%FBS+10%DMSO。

PS：若客户收到2ml小管细胞，收到细胞后，用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内，严格无菌操作；将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿，加入5ml左右*培养基混匀，放入培养箱过夜培养后查看细胞密度：若密度未超过80%，换液继续培养，视情况传代或者冻存。若密度超过80%，可直接进行传代（方法同上）。

慧颖生物是一家专业从事细胞培养相关产品的公司，拥有独立细胞房（可随时约定参观），供应胎牛血清，无血清细胞冻存液，无血清培养基，常规培养基，胰酶，双抗，*培养基，STR鉴定细胞，感受态细胞等，专业，专注，性价比高，是您Shou选之家。