除非另有说明，反相柱应始终使用至少 5% 的有机改性剂。在 95% 到 100% 的水溶液条件下，色谱柱可能会发生去湿/相塌陷，这意味着流动相会由于表面张力而从多孔系统中排出。该问题通常发生在流停止时。如果色谱柱已去湿，则可以通过泵送 10 到 20 个柱体积的纯甲醇/乙腈或含有至少 50%  有机改性剂的流动相来恢复它，但不能保证它会起作用。这种现象在 C18 和 C8 色谱柱中极为常见，其他反相色谱柱也应避免这种现象，以确保色谱的稳定性。

事实上，C8 和 C18 链形成了一个非常疏水的层，所以当流动相的有机含量低于 5% 时，它的表面张力会增加到流动相不能再润湿孔隙内部的程度，并且显然表现为分析物保留的可逆损失。 具有低碳载量（ 反相 HPLC 色谱柱 C6、C4、苯基、PFP 等另一方面）始终能够耐受较低浓度的有机物而不会发生任何保留偏移。

由于传统的 C18 HPLC 色谱柱在这些高含水条件下表现不佳，现在市场上有一类新型 RP-AQ 固定相，在这些恶劣条件下表现出不变的性能。它们的多功能性证明它们是常规 HPLC 分析以及 100% 水溶液条件下极性样品分析的理想选择。