一、为什么要流动状态下进行细胞培养？

　　1. 流体剪切力系统实验背景　

　　液体是所有生物的重要组成部分。许多细胞类型被运动的液体所包围。例如：

　　* 形成血管内层的血管内皮细胞，

　　* 形成淋巴管内层的淋巴管内皮细胞，

　　* 肾和肺的上皮细胞。

　　这种液体流动会产生剪切应力，这是一种以多种方式影响细胞形态和行为的机械力。在许多标准中体外实验中，细胞是在无流培养的。在这些静态条件下，不能考虑剪切应力相关的细胞变化。相比之下，在流动条件下的体外细胞培养模拟了这种机械刺激，并诱导了一种更生理的、类似于体内的行为。当使用生物流体系统中的细胞(如内皮细胞或上皮细胞)时，在流动条件下工作尤其重要。　　

　　血管中的内皮细胞(上)处于持续流动状态。使用流动下的体外细胞培养（下），可以模拟这些生理条件。

　　2、流动/剪切应力对细胞的影响

　　剪切应力是由液体对顶端细胞膜的摩擦引起的机械力。在体内，一些贴壁细胞类型暴露于生物流体系统中的机械剪切应力，如血液和淋巴管或肾单位。这种机械刺激对细胞的生理行为和粘附特性有很大的影响。细胞通过改变离子通道激活、基因表达和整个细胞层的重组来对剪切力做出反应。

　　剪切应力的测量单位是达因/平方厘米(dyn/cm2)。生理剪切应力值的范围从0.5到120 dyn/cm，且取决于血管类型(例如，动脉或静脉)、组织(例如，脑、结缔组织或心脏)和生物体的大小(例如，小鼠、大鼠或人类)。　　

　　人脐静脉内皮细胞(HUVEC)流动条件(20 dyn/cm²)下，在µ-Slide I 0.4Luer中培养超过9天。原代细胞在实验前24小时用腺病毒LifeAct载体转导。　　

　　二、不同类型的流动简要介绍

　　在不同的组织和环境中会出现几种具有特定特征的流体类型。基本上，流动类型可细分为层流和湍流：　　

　　1.层流

　　层流被定义为没有湍流的液体运动。 流体在平行的层中流动，它们之间没有中断。 层流可以细分为以下几种：

　　•单向层流

　　•脉动层流

　　•振荡层流

层流剖面图。箭头代表速度的分布

　　1）单向层流

　　在大多数小的健康生物血管中，例如小动脉和静脉中会遇到单向层流。 在体内某些细胞，例如内皮细胞和肾上皮细胞，经常暴露于流动中。

　　在实验上，通过在低壁通道中灌注介质，并通过保持流动方向和速度随时间恒定来实现单向层流。