周密的实验设置方案，以及成像前对细胞的优化、可重复的处理，是显微镜实验成功的关键。为此，必须考虑几个因素，这些因素取决于显微镜方法和所使用的一般设置。那么，实验方案的关键问题是什么？

　　*如何为您的实验和显微镜技术选择应用几何形状的实验器皿？

　　存在多种细胞培养容器以满足不同细胞培养测定的复杂性，例如使用悬浮或粘附细胞的实验、2D或3D测定、单培养或共培养测定等等。主要培养容器的几何形状（如生长面积和体积）是影响实验结果和解释的重要因素，在开始之前应仔细考虑。此外，容器几何形状影响实验中的物理（例如蒸发）和光学（例如弯液面效应）特性。

　　ibidi的解决方案

　　ibidi提供各种几何形状的成像小室

　　*您为您的特定细胞类型和显微镜方法选择了合适的基底、表面和涂层了吗？

　　细胞的培养、生长、发育和信号传导强烈依赖于用于细胞培养的表面。此外，光学规格要求强烈决定了哪种基底是可取的。硼硅酸盐玻璃被广泛用作基底，然而，涂层可能是支持细胞粘附所必需。然而，如果细胞表面需要特定的细胞外基质，则可以使用涂层，例如胶原I、胶原IV或聚-L-赖氨酸。对于悬浮细胞或球体培养，则应使用非粘附表面，如ibidi Bioinert生物惰性表面。此外，还需要考虑是进行2D还是3D实验。

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　　ibidi µ-Slides, µ-Dishes, and µ-Plates的突出特点是其超薄的盖玻片底部，非常适合显微镜应用。ibidi提供 ibidi Polymer Coverslip聚合物塑料底和ibidi Glass Coverslip玻璃底的实验器皿；也提供具有各种表面和涂层的成像小室，例如用于直接培养贴壁细胞的ibiTreat (tissue culture-treated) ibiTreat（组织培养处理的）表面。

　　Non-Adherent Bioinert Surface非贴壁生物惰性表面是一种稳定、生物惰性的表面，用于在没有任何细胞或生物分子粘附的非粘附表面上对类器官、球体和悬浮细胞进行长期培养和高分辨率显微镜观察。目前有 µ-Dish 35mm, high Bioinert。　　

　　ibidi µ-Patterning technology实现了各种2D和3D细胞培养应用的空间定义的细胞粘附。小型化的粘合剂图案（例如，线、正方形或点）不可逆地印刷在ibidi Polymer Coverslip的非粘性生物惰性表面上，从而实现精确控制的细胞粘附。　　

　　*您能确保细胞在培养过程中以及整个成像过程中都是健康的吗？

　　显微镜可以做活细胞和固定细胞，这取决于实验设置和所需的读数。因此，任何成像实验都只能使用有活力和健康的细胞。为了确保这一点，应每天在显微镜下控制细胞附着、形态、融合、营养供应和污染迹象。此外，一些参数，如温度和湿度，必须保持一致。　　

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　　许多显微镜技术，如相位对比、宽场荧光和共聚焦显微镜，都可以不受限制地使用任何具有ibidi Polymer Coverslip聚合物塑料底和ibidi Glass Coverslip玻璃底的ibidi实验器皿。　　

　　*当计划一个活细胞成像实验时，您的设置是否满足所有必要的要求？

　　如果连续或在特定时间点需要多个图像，那么活细胞成像可能是您的较佳选择。为了在活细胞成像实验中保持细胞的存活和健康，须在显微镜上建立和维持生理条件—与培养箱内的设置相同。

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　　ibidi Stage Top Incubation Systems 孵育系统可用于载玻片/培养皿和多孔板。它允许在任何倒置显微镜上进行短期和长期分析期间准确可靠地控制重要的活细胞成像参数。如果需要额外控制氧气水平，ibidi Stage Top Incubation Systems, CO2/O2 孵育系统是理想的解决方案。