COSMOSIL色谱柱的概述和保存方法
时间:2021-10-27 阅读:2286
COSMOSIL色谱柱是色谱仪分离试验中将多组分样品分离为单个组分的仪器,它是色谱分离系统的核心。色谱柱分为填充柱和毛细管柱两类,具有柱效高、选择性好,分析速度快等特点。检测色谱柱分离效率主要看三个参数:理论塔板数、分辨率、峰形。
1.理论塔板数
用于定量表示色谱柱的分离效率参数之一(柱效)。柱效取决于固定相的种类、色谱的柱效性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。塔板数是一个粗略的指标,不能作为评价色谱柱的标准。通常使用塔板数来考察色谱系统:将新柱子接到仪器上,根据色谱柱生产商提供的测试条件测试该色谱柱,应得到和分析报告上同样的结果。差也应该得到比报告值低10%的塔板数。如果所测塔板数远远低于厂家提供的报告数据,这就说明你的色谱系统可能存在一些问题。进样器、柱外效应、毛细连接以及检测器都是容易出现问题的地方。
2.分辨率
这是考察色谱柱的一个非常重要的指标,只要两个组分可以获得基线分离,对该分析物的定量就不会有什么问题。对于对称的高斯峰来讲,1.5的分辨率即可得到基线分离;若Rs在1.7-2.0之间则更好。若峰拖尾严重则需要更高的分辨率。使用分辨率作为色谱柱的评价指标的好处在于我们可以直观地看到相邻的峰的分离情况。
COSMOSIL色谱柱保存方法:
1.正相条件使用直接保存在正相流动相中;2.反相条件使用保存在甲醇或乙腈中注意:氰基柱与氨基柱在正反相交替使用时,注意用无水乙醇或异丙醇进行过渡,根据柱压控制适当的流速。反相氰基柱保存在有机溶剂的水溶液中(如55%乙腈水溶液),反相氨基柱保存在纯有机溶剂中(如乙腈)。
正相色谱柱清洗方法:
1.正相条件清洗方法,依次用异丙醇(注意流速)→甲醇→异丙醇→正相流动中进行使用。2.反相条件清洗方法,按以下方法进行清洗:以乙腈:水(1:9,v/v)→乙腈→乙腈:水(1:9,v/v)依次冲洗,然后进行使用。
正相色谱柱再生方法:
以甲醇:氯仿(50:50,v/v)→乙酸乙酯,分别用10~20倍柱体积反冲色谱柱,然后再按正方向用流动相平衡。