猪胰岛素样因子1(IGF-1)ELISA试剂盒原理
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2017-12-26 15:48:01
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上海沪鼎生物科技有限公司

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产品简介

猪胰岛素样因子1(IGF-1)ELISA试剂盒原理用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量。

详细介绍

猪胰岛素样因子1(IGF-1)ELISA试剂盒原理

l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量。

l 有效期:6个月

l 保存条件:2-8℃

l 本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

猪胰岛素样因子1(IGF-1)ELISA试剂盒原理主要优点

 1.高效、灵敏、特异的抗体;

 2. 稳定的重复性和可靠性;

 3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

 4. 适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

 5. zui大限度的节省实验经费。

常用的使用方法

一、双抗体夹心法测定抗原

将抗原免疫*种动物获得的抗体吸附于固相表面;

加抗原,形成抗原-抗体复合物;

加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;

加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体);

加底物。底物的降解量=抗原量。

二、直接法测定抗原

将抗原吸附在载体表面;

加酶标抗体,形成抗原—抗体复合物;

加底物。底物的降解量=抗原量。

三、间接法测定抗体

将抗原吸附于固相载体表面;

加抗体, 形成抗原-抗体复合物;

加酶标抗体;

加底物。 测定底物的降解量=抗体量。

问题解答

灵敏度是什么意思?

根据我司多年来的销售经验,我司了解到客户针对购买Elisa试剂盒时,灵敏度要求非常高。这是为什么呢?为您解析Elisa试剂盒灵敏度。Elisa试剂盒灵敏度高能使产品达到一定的数值,对产品试验有着非常大利益,它能检测到的分析物的zui小量,表示检测下限的能力。

相对灵敏度=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%

测定方法及表示方法:灵敏度标准品、质控血清、阳性标本稀释终点、血清盘(pannel)及临床标本阳性率。

灵敏度标准品可以从卫生部临检中心购买,质控血清可以从卫生部临检中心购买,也可以自己配制。因为质控血清不一定是原倍血清,或由于片段、亚型、位点等原因,评定试剂盒的灵敏度都带有一定的片面性。

阳性标本稀释终点的方法常用于不同试剂盒的比较,但也有上述的片面性。阳性pannel有些可以从卫生部临检中心购买,如HBsAg阳性pannel,也可以自己配制。临床标本阳性率,是一种粗略的估计,但对临床很实用。

注意事项

1. 由于产品底物显色剂对光及其敏感,因此要避光保存。

2. 检测吸光度前应将酶标仪打开,将其预热30min以上。

3. 孵育的时间应该严格按照试剂盒说明书上的时间为准。

4. 要尽量做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。

5. 对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。

结果计算:

在半对数坐标纸上绘制标准曲线。标准品的浓度为X轴,相应的OD值为Y轴,用四参数或对数-对数法绘制zui合适的标准曲线。浓度与OD值成反比关系,随着标准品浓度的增加,黄色强度就减少,即OD值减少样本浓度可直接从标准曲线上读取。如果样本实验前进行了稀释,则试剂盒zui后结果应乘以相应的稀释因子标准曲线为逆向S型曲线。

附:采用全自动酶标仪检测,只需检测前设置好酶标仪的相关参数,如坐标参数(线性,半对数)和计算方式参数(三次回归、四参数或双对数曲线方程),即可直接得到结果。

产品名称存放:收到货后贮存于4℃,强烈建议尽快使用配制的试剂1X缓冲液贮存于4℃,将不用的微孔板放回至密封袋内密封起来,贮存于4℃,已稀释的标准品,生物标记物,抗体和HRP贮存于4℃。

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