YEASEN外泌体抽提及鉴定试剂盒
时间：2021-07-31 阅读：1237
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背景介绍 ››
外泌体（Exosome）是由活细胞分泌的直径约为30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；存在于细胞培养上清液、血清、血浆、唾液、尿液、羊水以及其它生物体液中；外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息，不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用，更有望成为多种疾病的早期诊断标志物。
图1：外泌体的分泌以及外泌体的组成
外泌体*的结构，以及临床应用的良好前景，使得外泌体成了人们研究的热点。外泌体的分离方法通常包括密度梯度离心、差速离心、体积排阻、免疫分离以及聚合物沉淀等方法，但是这些方法耗时、操作复杂以及成本高等问题往往会影响人们对外泌体抽提试剂盒的选择。
外泌体不同提取方法的优缺点对比 ››
提取方法 | 优点 | 缺点 |
超速离心法 | 分离外泌体纯度较高 | 操作繁琐，耗时长 |
过滤离心 | 简单、省时，不影响外泌体的生物活性 | 纯度不足 |
密度梯度离心法 | 纯度较高 | 前期准备工作繁杂 |
亲和层析分离法 | 纯度高、重复性好 | 回收率低 |
外泌体沉降法 | 简单、无需特殊设备 | 周期长、易沉淀非外泌体污染物 |
凝胶排阻法 | 操作简单，分离外泌体纯度高 | 技术难度略高，易染菌 |
免疫磁珠法 | 保证外泌体形态的完整、特异性高、操作简单 | 生理性盐浓度会影响外泌体生物活性 |
色谱法 | 得到的外泌体大小均一 | 设备特殊，价格高，应用不广泛 |
图2：外泌体分离使用方法的统计
寻找一款简单、高效、快速、经济的提取外泌体的试剂盒是提取外泌体当务之急。
翌圣生物经过匠心研发，推出的外泌体快速抽提试剂盒，可以在短时间内获得大量形态完好的外泌体，获得的外泌体可用于下游外泌体标记、电镜分析、粒径分析、Western Blot分析、荧光定量分析和二代测序等。
外泌体的分离鉴定 ››
试剂盒种类 | 货号 | 适用范围 |
HieffTM Quick exosome isolation kit (for Cell Culture Media) 细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒 | 41201ES25/50 | 细胞培养基上清、尿液、腹水、胸腔积液、脑脊液、唾液（需稀释） |
HieffTM Quick exosome isolation kit (for Serum/Plasma) 血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒 | 41202ES08 | 血清、血浆、乳汁、卵泡液 |
不同品牌外泌体提取价格对比 ››
FAQ ››
Q1：样品在提取外泌体之前是否可以低温保存？
A：可以。长期请保存于-80℃，无须加冻存液；短期（1-2天内）则保存于4℃即可。
Q2：粘度过大的样品如何处理？
A：如果样品粘度过大时（因细胞分泌物较多所致），可将样品用1×PBS缓冲液进行等体积稀释，混匀稀释后的样品再使用本试剂盒提取外泌体。
Q3：培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？
A：多数情况下，细胞在体外培时养需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下两种方法：
（1）将细胞培养用的血清通过1×105g超速离心10h以去除血清外泌体；
（2）选择无血清培养基进行细胞培养。
Q4：无外泌体血清培养基（或者无血清培养基）在什么时候使用？
A：细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞融合度约为60%-70%时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基（或者无血清培养基），继续培养24-48h，细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。
Q5：细胞培养过程中的死细胞是否会影响外泌体的提取？
A：会的。在收获细胞时，应确定死亡细胞占比不超过5%。细胞凋亡/死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡，它们在外泌体的提取纯化过程中会污染活细胞产生的外泌体，同时有可能产生大量杂质。
Q6：外泌体如何保存？
A：纯化后的外泌体可于4℃保存不超过一周，-80℃条件下可长期保存，避免反复冻融。
Q7：如何鉴定提取的外泌体？
A：通常使用透射电镜检测（形态）、粒径检测（大小）、Western blot检测等方法鉴定提取的外泌体。在进行Western blot检测时，通常检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101等，优先推荐CD63和Tsg101）。
Q8：组织细胞外泌体如何提取？
A：无菌环境下将组织剪成小块（越小越好），然后在无血清的培养基中培养12h；将培养液转移至离心管中，于4℃以3000g离心20 min去除培养液中杂质和细胞碎片，将上清液转移至新的离心管中；先使用0.45μm滤器过滤上清液，接着使用0.2μm滤器过滤上清液，再按照本试剂盒说明书提取外泌体。
Q9：血清（尤其是血浆）加了1×PBS重悬之后，沉淀不溶现象
A：血清样本沉淀较为粘稠，可多次反复吹打，或者适当增加1×PBS的用量。
产品订购 ››
产品应用 | 货号 | 名称 | 规格 | 价格（元） | *（元） |
外泌体分离 | 41202ES30 | HieffTM Quick exosome isolation kit (for Serum/Plasma)血清/血浆外泌体快速抽提试剂盒 | 30 mL | 2155 | - |
41201ES25/50 | HieffTM Quick xosome solation kit (for Cell Culture Media)细胞培养上清外泌体快速抽提试剂盒 | 25/50 mL | 2155/3855 | - | |
外泌体定量 | 20118ES60 | Lysis Buffer for WB/IP Assays免疫印迹及免疫沉淀用（WB/IP）裂解液 | 100 mL | 228 | - |
20201ES76 | BCA Protein Quantification Kit BCA蛋白浓度测定试剂盒（增强型） | 500 T(100 mL) | 288 | - | |
外泌体鉴定（Western Blot） | 41203ES05 | Exosome identification kit for Western Blot外泌体鉴定试剂盒 | 5T | 3683 | 3315 |
36230ES10 | Precast Protein Improve Gels, 8%-20%, 10 wells 8%-20%高分辨率梯度预制胶,10孔 | 1盒（10块） | 573 | 378 | |
36231ES10 | Precast Protein Improve Gels,,4%-20%, 10 wells 4%-20%高分辨率梯度预制胶,10孔 | 1盒（10块） | 573 | 378 | |
36232ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 8%, 10 wells 8% 高分辨率梯度预制胶,10孔 | 1盒（10块） | 573 | 378 | |
36233ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 10%, 10 wells 10%高分辨率梯度预制胶,10孔 | 1盒（10块） | 573 | 378 | |
36234ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 12%, 10 wells 12%高分辨率梯度预制胶,10孔 | 1盒（10块） | 573 | 378 | |
36235ES10 | Precast Protein Improve Gels,, 15%, 10 wells 15%高分辨率梯度预制胶,10孔 | 1盒（10块） | 573 | 378 | |
20351ES76 | GoldBand 3-color Regular Range Protein Marker (10-180 kDa) 三色预染蛋白质分子量标准 | 2×250 μL | 676 | 585 | |
20352ES76 | GoldBand 3-color High Range Protein Marker (10-245kDa) 三色预染蛋白质分子量标准 | 2×250 μL | 786 | 615 | |
外泌体标记 | 40725ES10/25 | DiO (DiOC18(3)) 细胞膜绿色荧光探针 | 10 mg/25 mg | 488/988 | - |
40726ES10 | DiI (DiIC18(3)) 细胞膜橙红色荧光探针 | 10 mg | 398 | - | |
40757ES25 | DiR Iodide (DiIC18(7)) 细胞膜深红色荧光探针 | 25 mg | 988 | - | |
40758ES25 | DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 细胞膜红色荧光探针 | 25 mg | 988 | - |
HB20210727