转铁蛋白(Transferrin)——无血清细胞培养添加物
时间:2019-08-09 阅读:1556
转铁蛋白(Transferrin)
------无血清细胞培养添加物
>>>背景介绍
转铁蛋白又名运铁蛋白(Transferrin,TRF、Tf),负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以三价铁复合物(Tf-Fe3+)的形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。转铁蛋白主要存在于血浆中,血浆中的转铁蛋白供应机体绝大部分组织的铁,而在其不能到达的部位,由这些组织自己合成的转铁蛋白在局部产生转铁作用。
图1: 转铁蛋白的结构
人转铁蛋白(Human Transferrin)主要在肝脏合成,是由位于同源N-端和C-端的两个叶片(Lobe)组成的一种单链糖蛋白。人转铁蛋白共含678个氨基酸残基,等电点为5.9、分子量为76kD。每分子的转铁蛋白能携带2个三价铁离子(Fe3+)。转铁蛋白与Fe3+的相互作用取决于pH,pH为7.4时,转铁蛋白与Fe3+结合,在酸性pH下两者分离。
>>>存在形式
>>>作用机制
转铁蛋白(Tf)结合铁是通过与其受体,即Transferrin Receptor 1(TfR1)相互作用而实现的。TfR1 是一种表达于细胞表面的糖蛋白,由两个同源二聚体的亚基通过二硫键连接而成。在细胞表面,Tf与Fe3+相互作用形成全铁-Tf,并与TfR1受体结合,在细胞内吞作用下进入核内体。在偏酸性核内体的环境中,Fe3+与Tf分离,同时STEAP3将Fe3+还原为Fe2+,并被二价金属离子转运蛋白1(DMT1)转运到细胞质中,然后释放了Fe3+的Tf与TfR1组成Tf/TfR1复合物,通过胞吐作用回游到细胞表面。在细胞表面,转帖蛋白(Tf)与受体TfR1分离,成为脱铁-Tf,然后再与Fe3+重新结合参与铁循环。整个过程完成后Tf和TfR1被循环利用,进入细胞摄取铁的下一个周期中。
图2: 转铁蛋白循环机理图
>>>转铁蛋白主要功能
>>>转铁蛋白来源
| 来源 | 安全性 | 批次差别 |
提取的转铁蛋白 | 从人、牛的血浆中提取 | 安全性差,终产品可能含有病原体 | 转铁蛋白从不同批次的人血清或牛血清中提取,性能差别大 |
重组转铁蛋白 | 从原核、真核细胞中表达 | 安全性好,终产品不含有病原体 | 每批次均用同一细胞株表达,性能稳定 |
>>>产品特点
安全性好:产品通过多层质检检测,避免了病原体的污染;
毒性小:细胞毒性非常低,对后续实验没有影响;
性能稳定:每批次均从同一细胞株中表达,性能差别小,蛋白纯度高
操作简单: 只需将产品加入培基中即可;
应用性广:可适用于不同类型细胞的培养。
>>>FAQ
Q1:无血清培养基中应该添加提取的转铁蛋白,还是重组的转铁蛋白?
答:提取的转铁蛋白具有安全性差和批间差大等缺陷,尤其是将提取的转铁蛋白添加于用于细胞培养的无血清培养基中时,可能会将人或动物的病原体(如疯牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原体)带入细胞中,污染细胞。重组的转铁蛋白*避免了病原体污染的可能性,因此无血清培养基中更应该添加重组的转铁蛋白。
Q2:培养基中应该添加铁饱和(Holo)转铁蛋白,还是脱铁(Apo)转铁蛋白?
答:当培养基中不含铁或铁含量较低时,选择添加铁饱和(Holo)的转铁蛋白;当培养基中富含铁时,选择脱铁转铁蛋白。
Q3:铁饱和(Holo)的转铁蛋白和脱铁(Apo)的转铁蛋白,哪个效果好?
答:无法从理论上推断出两者的效果好坏,需要通过实验检测。
Q4:转铁蛋白在无血清培养基中的浓度是多少?
答:转铁蛋白的浓度和细胞类型有关,具体的浓度与细胞状态、细胞浓度、实验目的有关。一般原代细胞:5-100mg/L;中国仓鼠卵巢细胞:10-50mg/L;杂交瘤和Vero细胞:5-20mg/L
>>>订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格(元) |
牛脱铁转铁蛋白(Bovine Transferrin, APO) | 40102ES60 | 100 mg | 868.00 |
Bovine Transferrin (HOLO) 牛饱和铁转铁蛋白 | 40103ES80 | 1g | 4236.00 |
Human Transferrin 人转铁蛋白 | 40133ES60 | 100 mg | 1187.00 |
HB20190807