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转铁蛋白(Transferrin)——无血清细胞培养添加物

时间:2019-08-09      阅读:1556

转铁蛋白(Transferrin)

------无血清细胞培养添加物

 

>>>背景介绍

转铁蛋白又名运铁蛋白(Transferrin,TRF、Tf),负责运载由消化管吸收的铁和由红细胞降解释放的铁。以三价铁复合物(Tf-Fe3+)的形式进入骨髓中,供成熟红细胞的生成。转铁蛋白主要存在于血浆中,血浆中的转铁蛋白供应机体绝大部分组织的铁,而在其不能到达的部位,由这些组织自己合成的转铁蛋白在局部产生转铁作用。

 

图1: 转铁蛋白的结构

人转铁蛋白(Human Transferrin)主要在肝脏合成是由位于同源N-端和C-的两个叶片(Lobe)组成一种单链糖蛋白人转铁蛋白共含678个氨基酸残基,等电点为5.9、分子量为76kD。每分子的转铁蛋白能携带2个三价铁离子(Fe3+)转铁蛋白与Fe3+的相互作用取决于pH,pH为7.4时,转铁蛋白与Fe3+结合,在酸性pH下两者分离。

 

>>>存在形式

 

 

>>>作用机制

转铁蛋白(Tf)结合铁是通过与其受体,即Transferrin Receptor 1(TfR1)相互作用而实现的。TfR1 是一种表达于细胞表面的糖蛋白,由两个同源二聚体的亚基通过二硫键连接而成。在细胞表面,Tf与Fe3+相互作用形成全铁-Tf,并与TfR1受体结合,在细胞内吞作用下进入核内体。在偏酸性核内体的环境中,Fe3+与Tf分离,同时STEAP3将Fe3+还原为Fe2+,并被二价金属离子转运蛋白1(DMT1)转运到细胞质中,然后释放了Fe3+的Tf与TfR1组成Tf/TfR1复合物,通过胞吐作用回游到细胞表面。在细胞表面,转帖蛋白(Tf)与受体TfR1分离,成为脱铁-Tf,然后再与Fe3+重新结合参与铁循环。整个过程完成后Tf和TfR1被循环利用,进入细胞摄取铁的下一个周期中。

 

图2: 转铁蛋白循环机理图

 

>>>转铁蛋白主要功能

 

 

 

 

>>>转铁蛋白来源

 

 

来源

安全性

批次差别

提取的转铁蛋白

从人、牛的血浆中提取

安全性差,终产品可能含有病原体

转铁蛋白从不同批次的人血清或牛血清中提取,性能差别大

重组转铁蛋白

原核、真核细胞表达

安全性好,终产品不含有病原体

每批次均用同一细胞株表达,性能稳定

 

>>>产品特点

安全性好产品通过多层质检检测,避免了病原体的污染;

毒性小细胞毒性非常低,对后续实验没有影响;

性能稳定每批次均从同一细胞株中表达,性能差别小,蛋白纯度高

操作简单 只需将产品加入培基中即可;

应用性广可适用于不同类型细胞的培养。

 

>>>FAQ

Q1:无血清培养基中应该添加提取的转铁蛋白,还是重组的转铁蛋白

答:提取的转铁蛋白具有安全性差和批间差大等缺陷,尤其是将提取的转铁蛋白添加于用于细胞培养的无血清培养基中时,可能会将人或动物的病原体(如疯牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原体)带入细胞中,污染细胞。重组的转铁蛋白*避免了病原体污染的可能性,因此无血清培养基中更应该添加重组的转铁蛋白。

Q2:培养基中应该添加铁饱和(Holo)转铁蛋白,还是脱铁(Apo)转铁蛋白?

答:当培养基中不含铁或铁含量较低时,选择添加铁饱和(Holo)的转铁蛋白;当培养基中富含铁时,选择脱铁转铁蛋白。

Q3:铁饱和(Holo)的转铁蛋白脱铁(Apo)的转铁蛋白,哪个效果好?

答:无法从理论上推断出两者的效果好坏,需要通过实验检测。

Q4:转铁蛋白在无血清培养基中的浓度是多少?

答:转铁蛋白的浓度和细胞类型有关,具体的浓度与细胞状态、细胞浓度、实验目的有关。一般原代细胞:5-100mg/L中国仓鼠卵巢细胞10-50mg/L杂交瘤和Vero细胞5-20mg/L

 

>>>订购信息

产品名称

货号

规格

价格(元)

牛脱铁转铁蛋白(Bovine Transferrin, APO)

40102ES60

100 mg

868.00

Bovine Transferrin (HOLO) 牛饱和铁转铁蛋白

40103ES80

1g

4236.00

Human Transferrin 人转铁蛋白

40133ES60

100 mg

1187.00

 

 HB20190807

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