巨噬细胞清除小课堂 | 第一课：注射方法及给药
时间：2024-11-20 阅读：70
巨噬细胞在身体的不同部位发挥着关键的作用，然而，为了更深入地研究特定部位巨噬细胞的具体功能以及它们在疾病发生发展中的影响，精准地清除巨噬细胞成为了关键的研究手段。氯磷酸盐脂质体（Clodronate Liposomes）是目前最为成熟，最为经济且最为理想的一种有效的巨噬细胞清除工具。借助腹腔，尾静脉等多种给药方式实现不同组织部位中巨噬细胞的清除。
接下来，我们将通过一系列专题分享，为大家展示在不同部位进行巨噬细胞清除的方法与成效，希望能为各位科研工作者提供有益的参考和借鉴。
注射方法介绍
尾静脉注射
尾静脉注射在24h后即达到最大耗竭，应注意检测时间节点。
将小鼠放在倒扣的饭盒内，从孔口拉出尾巴，小鼠的尾部有2条动脉和3条静脉，2条动脉分别在尾部的背侧面和腹侧面，3条静脉呈品字型分布，一般采用左右两侧的静脉；
将纱布浸泡于约70℃温水中（或浸泡在酒精中），拿出后包裹尾巴，以达到使尾部血管扩张及软化表皮角质的目的；
有的实验需连日反复尾静脉注射给药，注射部位应尽可能从尾端开始，按次序向尾根部移动，更换血管位置注射给药。拔出针头后，用棉球按住注射部位轻压1-2 min，止血；
腹腔注射
腹腔注射在48-72h后达到最大耗竭，应注意检测时间点。
首先采用背侧保定法抓取小鼠，使其头部稍向后仰，腹部向上，小鼠左后肢用小指固定住，再用75%酒精棉球消毒注射部位；
小鼠腹腔注射的位置在：下腹部腹中线两侧0.5cm（与大腿根部平齐）处，未免伤及脏器，保定小鼠时需使其头部稍向后仰，以使其下腹部脏器上移；
回抽针栓，如无回血或液体即可注入药物；
注射完毕后，轻轻旋转针头，再缓慢拔出注射器，以免液体外漏。
不同研究部位，也会有不同的注射方法，如：皮下注射、气管给药、颅内注射等。实验前应参考相关文献及咨询Yeasen技术团队。
给药周期及计量
即需要超过一周或以上实现巨噬细胞清除。以WT小鼠为例，一般先给药200 μl（20-25g体重），之后每2 - 3天给药一次，每次用量100μl-150μl。
参考试验方案
器官/ 巨噬细胞 | 剂量用法 (20-25g/每只小鼠 ) |
脾脏/红髓区巨噬细胞 | 单次给药：200 µl/小鼠 (静脉注射或腹腔注射)。 长期耗竭：第一次给药剂量200 µl/小鼠（25g左右），以后按2-3天一次给药100 µl/小鼠 |
肝脏/Kuffer细胞 | 单次给药：200 µl/小鼠 (静脉注射或腹腔注射)。 长期耗竭：第一次给药剂量200 µl/小鼠，以后按2-3天一次给药100 µl/小鼠 |
肺/肺泡巨噬细胞 | 静脉注射（150-200 µl）联合气管内或鼻内（50 µl）获得最佳效果。 |
淋巴结 | 注射(100-200 µl)/小鼠，具体给药方案可参考文献。 |
脑/小胶质细胞 | 脑室内进入脑脊液，10 µl/小鼠，50 µl/大鼠。 |
血液/单核细胞 | 150-200 µl/小鼠（静脉注射），24小时内可达最大耗竭率，但1-7天的最大耗竭率与小鼠品系有关。 |
注：以上仅参考，实验前应参考相关文献及咨询YEASEN技术团队
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产品名称 | 货号 | 规格 |
Clodronate Liposomes(From Vrije Universiteit Amsterdam) 体内巨噬细胞清除剂 | 40337ES08 | 5 mL |
40337ES10 | 10 mL | |
Control Liposomes( PBS ) 体内巨噬细胞清除剂空白脂质体对照 | 40338ES08 | 5 mL |
40338ES10 | 10 mL |