HB170817

Hieff NGS^TM RNA Cleaner

产品信息

产品描述

Hieff NGS^TM RNA Cleaner是翊圣生物自主研发的专门用于RNA纯化的磁珠，本产品利用*的磁珠与缓冲液系统，可以特异性地吸附RNA，有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本，体外转录的RNA产物，RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。

运输与保存方法

冰袋运输。2-8℃保存，效期一年。避免冷冻！

使用方法

所需额外试剂

100% 乙醇，Nuclease-free水，磁力架，Nuclease-free离心管。

实验前准备

将RNA clean beads 从4 ℃取出，平衡至室温（约30 min）。

纯化流程

RNA纯化过程如图1所示，具体操作参考以下说明。

图1 RNA纯化流程

1. 样本稀释：在一个Nuclease-free PCR管中，用Nuclease-free水将0.5-5 μg总RNA稀释至50 μL。

2. 磁珠结合：颠倒或涡旋振荡混匀磁珠，吸取2×磁珠悬液（100 μL）加入至50 μL 的RNA样品中，用移液器吹打6次，

使其充分混匀。室温孵育5 min，使RNA与磁珠*结合。

3. 分离：将上述孵育后的样品置于磁力架上5 min，待溶液澄清后，小心移除上清。

4. 漂洗：保持样品置于磁力架上，加入200 μL新鲜配制的80%乙醇，漂洗磁珠，室温孵育30 s，小心移除上清。

【注】：1）漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制，防止引入RNase酶导致RNA降解。

2）建议在该轮漂洗后，室温静置2 min，再进行下一轮漂洗，有助于提升RNA回收效率。

5. 再次漂洗：重复步骤4，共漂洗2次。

6. 磁珠干燥：保持样品始终处于磁力架上，开盖空气干燥磁珠5 min。

【注】：磁珠开盖晾干时要避免过分干燥，如果磁珠出现龟裂，则提示磁珠过分干燥，此时RNA的洗脱效率会降低。

7. 洗脱：将样品从磁力架上取出，加入21 μL Nuclease-free水，用移液器吹打6次以充分混匀，室温静置5 min。

8. 样本转移：将样品置于磁力架5 min，待溶液澄清后，小心转移上清20 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。

【注】：建议转移上清时留2-3 μL液体，以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定，建议尽快进入后续实验。若

要保存，请置于-80℃保存。

注意事项

1）磁珠使用前务必要回温至室温，并充分混匀，否则可能影响样品的回收效率。

2）操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。

3）80%乙醇需现用现配，否则将影响回收效率。

4）本产品和其他试剂配套使用时，请按照具体实验说明来进行操作。

5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

结果展示：

使用总RNA纯化磁珠纯化前后，RNA样品qRT-PCR Ct值变化

【注】：使用Hieff NGS^TM RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂，让检测结果更加真实。

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