分光光度计是操作精力对光的决议性吸收发展精力的定性或定量分析的仪器，在各行各业得到了遍及使用，首要用于精神纯度搜查、定量阐发、物质结构鉴别等。可测量下场总会涌现可接受或不行承受的缺点，误差来源于测量历程的方方面面，我以为首要来历于仪器自己机能与丈量条件的决意两个方面。 

　　1仪器自己功能带来的时弊

　　1.1复色光对比耳定律的偏离

　　分光光度计比耳定律建设的前提前提是人射光是单色光，可是精度再高的仪器，纵然是双单色器的分光光度计，也只能获得近乎单色的光，无奈获得纯单色光，它仍然含有局促光通带，具有复色光的素质。而复色光会招致比耳定律的正或负偏离。静止狭缝的紫外分光光度计光谱带宽通常是1nm或2nm，可调狭缝的可能做到0.Inm;可见分光光度计带宽6nm、snm，致使十几纳米。光谱带宽理当是越小越好，可是跟着光谱辨别率的提高，仪器的活络度低沉，所以决意仪器时要综合思虑各种前提的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时，可不异认为切合比耳定律。

　　1.2杂散光的影响

　　分光光度计杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽畛域外的其他波长组分，它是光谱测量中弊病的首要泉源。发作原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边沿波长处，由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器天真度都较低，杂散光的影响更为显着。杂散光限定仪器的阐发上限可惹起老火的丈量害处，理论任务中，在定量综合时，一样平常在吸引峰或其附近处丈量样品吸光度，要是在剖析波好处含有杂散光，这时候样品的透光率较小，而杂散光大有部分透过，使丈量吸光度低于真实吸光度。1.3仪器噪声对测t的影响

　　分光光度计仪器噪声也是仪器的一个重要目的，它表征仪器做稀溶液的伎俩。是叠加在待测量的剖析信号中的不需要的信号，扫描100%T与0%T线，可察看到分光光度计的相对于噪声程度，若是仪器噪声较大，会掩盖较小的测量信号，通常用噪音的二倍来展示仪器的锐敏度。

　　1.4波长与吸光度粗略度

　　分光光度计样品的每一个值都是在一定的波长下测得的，要是波长误差很大，测出的值必然不准。吸光度粗略度也是用户对仪器的直接要求，更应惹起充盈的重视。国家计量检定例程划定规矩双光束紫外可见分光光度计透射比正确度为*士0.6%, B级土1.0%。

　　2丈量条件的选择

　　2.1参比溶液与溶荆的决意

　　分光光度计分光光度计的丈量现实上因而经由参比池的光强度作为人射光强度来测定试样的吸光度，先调节仪器使透过参比池溶液的吸光度为零，而后让对抗束光经过样品，使得吸光度比照着实地反映待测肉体的浓度，以是参比溶液的抉择颇为需要。假定*待测精力与显色剂的反馈产物有吸收，可用纯溶剂或蒸馏水作参比溶液。如果显色剂有色采，并在测定波长下有排汇，则用显色剂溶液作参比溶液，所加人显色剂及其他试剂的量，与试样中的加入量应差别。假如样品中其他组分本人的色调对测定有滋扰，而所用显色剂没色采，则用不加显色剂的样品溶液作参比液。

　　正确抉择合适的溶剂，对前进剖析的准确度起需求劝化。为减小溶剂中杂质的影响，应决定高纯度的溶剂;溶剂应不与待测物资发生化学反馈;待测物在溶剂中要有一定的溶解度;在测定的波长范围内，溶剂本人没有吸引，当心常用溶剂的短可用波长;当用挥发性大的溶剂时，测量进程中吸引池应加盖。

　　2.2测试波长的决意

　　分光光度计当用分光光度计对溶液进行测守时，起首需要决意合适的测量波长。决定的遵照是该被测溶液的吸引曲线。在一样平常状况下，我们老是选择大吸收波长作为丈量波长，何等或许提高灵活度。而在有些状况下大吸收峰很敏锐、吸收过大或相近有干扰具备，就不克不及选大吸引波长，而必需在包管有定然灵活度的情况下，抉择吸引曲线中的另外波出路行测定(曲线较平坦处对应的波长)，以消除干扰。绘制吸收曲线是正确抉择波长的无效手段与方式。