摇瓶机的基本操作要领后，逐步按以下步骤进行摇瓶机细菌培养试验：

　　1、复苏：根据所培养的细菌选择适宜的培养基，大部分细菌在LB培养基中在超净工作台先用1毫升左右的适宜的培养基溶解冷冻菌，然后转移到10毫升中试管中，一般在37摄氏度摇床静止或低转速培养12小时或者过夜（温度取决于所培养的细菌适宜生长的温度）。

 

　　2、平板划线培养：在平板划线，放37摄氏度培养箱培养箱中倒置培养6小时~12小时，在平板上观察是否形成了单菌落。

 

　　3、挑单菌落：在超净台中挑选典型单菌落，置入10毫升中试管中，在37摄氏度摇床，转速200转培养12小时或者过夜，肉眼能看到试管浑浊。

 

　　4、按照1：20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶，，培养条件同前。注意：所有的接种操作均需要在层流罩中，培养基应无菌。