2023年Q4，Incucyte这个应用最受欢迎
时间：2024-01-18 阅读：467
Incucyte® 实时活细胞分析系统是一款革命性的细胞成像设备，可置于培养箱的稳定环境中，对细胞进行数天、数周甚至数月的长期分析，其强大的功能、易于操作的界面、精准的多参数计算使得很多用户对其爱不释手，在细胞水平的体外实验中有着广泛应用。截止至目前，应用Incucyte® 发表的文章总数已经超过了15,000篇！
近日，陈老师收集了2023年第四季度近30个单位发表的40余篇国内文章（文献列表见文末），就让我们一起看看，哪个应用最热门吧。
北京航空航天大学 | 1 | 中国科学院上海药物研究所 | 1 |
南方医科大学 | 1 | 中山大学附属第六医院 | 1 |
泉州师范大学 | 1 | 滨州医学院 | 1 |
重庆大学 | 1 | 西南医科大学附属医院 | 1 |
中山大学附属七院 | 1 | 华中科技大学 | 1 |
重庆医科大学 | 2 | 暨南大学 | 1 |
澳门大学 | 4 | 上海仁济医院 | 2 |
上海交通大学 | 2 | 浙江大学 | 1 |
北京大学肿瘤医院 | 1 | 中山大学肿瘤防治中心 | 1 |
苏州多玛生物 | 1 | 南京中医药大学 | 1 |
中国科学院水生生物研究所 | 1 | 复旦大学 | 1 |
首都医科大学 | 1 | 北京协和医学院 | 1 |
百奥赛图 | 4 | 华西医院 | 1 |
中山大学附属五院 | 3 | 沈阳药科大学 | 1 |
广州生物岛实验室 | 1 | ||
表1. 2023 Q4 Incucyte® 文章第一作者单位分布
从文章的分布单位来看，很多单位在一个季度里就应用Incucyte® 发表了多篇文章，比如中山大学附属五院、澳门大学、百奥赛图等。利用Incucyte® 可以高效地获取实时细胞信息、快速获得可信的研究成果，并且简单易用，能在短时间内生成多个精确数据，是文章发表的利器！也是实实在在可以买得起、用得好的仪器！
图1. Incucyte® 应用非常广泛，从这些文章应用方向上看，除了传统的细胞增殖活性、划痕迁移实验，还有血管生成、3D拍摄等应用。
接下来，陈老师就选几篇带有新应用的国内文章为大家一一介绍：
最多应用
中山大学附属第六医院
鼻咽癌新靶点[1]
自噬与鼻咽癌（NPC）放射耐药有关。复制蛋白A1（RPA1）和RPA3是RPA复合物的底物，是逆转鼻咽癌放射耐药性的潜在治疗靶点。然而，RPA在自噬中的作用尚未明确。为了揭示NPC细胞中RPA抑制剂（RPAi）药理学和细胞毒性机制，以及RPAi介导的自噬调节NPC放射敏感性的潜在机制。文章鉴定了一种有效的RPAi（HAMNO），它在体外对NPC细胞系的放射敏感性增强和增殖抑制显著相关。并发现RPAi通过诱导自噬流动、AMPK/mTOR通路激活和降低糖酵解功能的自噬相关基因转录等多个水平上诱导自噬。将氯喹（CQ）治疗或基因抑制自噬调节因子ATG5和RPAi治疗相结合，可以协同抑制自噬，在增强NPC对辐射的抗肿瘤反应方面比单独使用任何一种方法更有效。本研究提出了一种新的治疗策略，同时破坏RPA和自噬过程的药理学抑制剂可提高鼻咽癌对辐射的反应性。Incucyte® 在该文中被用来检测肿瘤细胞、肿瘤球在药物处理下的增殖、以及葡萄糖的内吞等多个应用。
图2. 通过Incucyte® 检测三种NPC细胞系的增殖发现，RPAi（HAMNO）可以加强放射治疗IR的灵敏度
图3. 通过2-NBDG指示剂和Incucyte® 检测葡萄糖摄入，发现RPAi（HAMNO）可以抑制葡萄糖的摄入
图4. 通过Incucyte® 检测肿瘤球增殖发现，氯喹和RPAi（HAMNO）对肿瘤球成长的抑制具有协同作用
Incucyte® 可以拍摄和分析3D培养，比如肿瘤球和类器官。反正放在培养箱里拍摄，想拍多久就拍多久。
最新应用
复旦大学
神经退行性疾病新机制[3]
线粒体损伤的增加在许多神经退行性疾病中起着关键作用，例如帕金森病（PD）和唐氏综合征（DS）。因此，小分子化合物增强线粒体降解可能为解决这些疾病提供有希望的新策略。这篇文章探索了通过自噬拴系化合物（ATTEC）将线粒体靶向自噬来诱导线粒体清除的策略。证明双功能化合物（mT1）同时与线粒体外膜蛋白 TSPO 和自噬体蛋白 LC3B 结合，可能会增强自噬体对受损线粒体的吞噬和随后的自噬降解。初步实验表明，mT1 在 PD 细胞模型和 DS模型中都减弱了疾病相关表型。本文证明了双功能ATTECs降解线粒体的可能性，这证实了ATTECs降解细胞器的能力，并为干预线粒体相关疾病提供了潜在的新策略。Keima 是一种对 pH 敏感的双激发荧光蛋白，对溶酶体蛋白酶具有抗性。酸性pH值下在620 nm处具有单个发射峰。Mito-Keima 通过线粒体的色素 c 氧化酶亚基 VIII （COX VIII）的靶向序列在线粒体上特异性表达。mito-Keima 可以指示线粒体是否已进入溶酶体（pH 4.5）。本文通过Incucyte®和Keima来检测线粒体自噬水平。
图5. 通过Incucyte® 监控红色荧光发现，加入mT1抑制剂后，线粒体吞噬加强，但是敲除mT1的靶点TSPO再加入mT1后，mT1导致的线粒体吞噬减弱
只要有合适的荧光指示剂，Incucyte® 啥都能做！
最多数据
澳门大学
糖尿病新机制发现[3]
非程序性巨噬细胞极化，尤其是促炎性巨噬细胞的长时间激活，与糖尿病目标的伤口愈合延迟有关。巨噬细胞来源的外泌体携带多种microRNA（miRNA），参与伤口愈合的不同阶段。骨髓来源的原代巨噬细胞BMDM（M0-Exos）、干扰素γ加脂多糖极化 BMDM（M1-Exos） 和白细胞介素-4 极化 BMDM（M2-Exos） 中分离出外泌体。与 M0-Exos 相比，M1-Exos 损害了人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的迁移和微管形成，而 M2-Exos 表现出相反的效果。共鉴定出 63 个 miRNA 在源自极化 BMDM 的外泌体中差异表达。其中，miRNA-155-5p在M1-Exos中高表达，阻断了HUVECs的血管生成。此外，miRNA-155-5p 直接与生长分化因子 6（GDF6） mRNA 的 3′ UTR 结合以抑制其蛋白表达。这项研究破译了极化巨噬细胞外泌体中miRNA的表达谱。M2样巨噬细胞衍生的外泌体和miRNA-155-5p抑制剂可能是治疗糖尿病足溃疡的有前途的药物。
图6. 左图为不同来源外泌体对HUVEC的增殖影响，分别从总分支长度、节点数等来进行统计；右图为划痕迁移实验的结果
图7. 左图为miRNA-155-5p对HUVEC的划痕迁移的影响；右图为增殖实验的结果，分别从总分支长度、节点数等来进行统计
本文章数据很多，Incucyte® 一次性可以扫描6块板并提供划痕工具，还可以迅速对划痕平均距离等进行计算，大大提高了划痕测试通量
为什么Incucyte® 那么火热呢？
培养箱内无限时间的连续观察，最短几分钟的间隔拍摄，自动化的图像采集，减少人力，防止过多操作对细胞的伤害
6个板位，分别独立设置检测程序，可以兼容各种孔板和培养皿，通量高
高效简便的模块化软件设置和数据分析，输出图片、视频、生长曲线等多指标多参数
> 100种优化过的配套荧光试剂和耗材及详尽的Protocol
活细胞监测：优化高级细胞模型的工作流程
点击下载白皮书，了解Incucyte®如何在细胞分析工作流程的各个阶段为科学家提供帮助。
-参考文献-
[1] Targeting RPA promotes autophagic flux and the antitumor response to radiation in nasopharyngeal carcinoma. Journal of Translational Medicine，2023
[2] Targeted clearance of mitochondria by an autophagy-tethering compound (ATTEC) and its potential therapeutic effects.Science Bulletin.Volume 68, Issue 23, 15 December 2023, Pages 3013-3026
[3] Exosomal miRNA-155-5p from M1-polarized macrophages suppresses angiogenesis by targeting GDF6 to interrupt diabetic wound healing.Molecular Therapy - Nucleic Acids.Volume 34, 12 December 2023, 102074