新品上市:明胶酶谱实验配套用的配胶试剂盒
时间:2022-08-04 阅读:1162
新品上市:明胶酶谱实验配套用的配胶试剂盒
很多老师在使用我们的明胶酶谱试剂盒时候,还需要自己准备配置大胶小胶用的试剂,上海信帆特别推出配套用的配胶试剂盒,一步解决实验中遇到的各种问题,下面我们一起来了解一下吧、
描述:本产品提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制高质量的各种浓度的变性PAGE胶,方便,快捷。本试剂盒至少可以配制30块常规大小的PAGE胶,并且其中的分离胶缓冲液和浓缩胶缓冲液中已加入10%SDS,使用时无需另外加入。
组成:
产品名称 | 包装 | 保存条件 |
30%Acr-Bis(29:1) | 100ml | 2-8℃ 避光 |
分离胶缓冲液 | 80ml | 室温 |
浓缩胶缓冲液 | 25ml | 室温 |
APS(过硫酸铵) | 0.5g | 室温 |
TEMED | 1ml | 室温、避光 |
*试剂盒中提供的APS(过硫酸铵)为固体粉末,使用前加入双蒸水溶解即配制成10%APS(0.5g APS加入5ml双蒸水),将溶液分装后置于-20℃保存,通常半年内有效。
操作步骤:根据目的蛋白分子量大小选择合适的凝胶浓度,不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围参考附表1。
1.灌制分离胶
(1)参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
(2)将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。
(4)将分离胶溶液灌入凝胶玻璃槽中,然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层,用于压平液面。
(5)静置30-60min,至分离胶凝固。
2.灌制浓缩胶
(1)去除覆盖在分离胶上的水层,并用滤纸吸干,水份吸不干,可能会导致浓缩胶和分离胶分开。
(2)将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和双蒸水在小烧杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌混匀,避免产生气泡。
(4)将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,插入样品梳,避免产生气泡,静置20-30min,直至浓缩胶聚合。
(5)待凝胶聚合后,小心拔下梳子,以免破坏加样孔。
(6)进行常规电泳。
注意事项:
1.10%APS配置好后,应当-20℃保存,并且应尽量减少室温存放时间,以防失效。
2.TEMED易挥发,使用后请拧紧瓶盖。
3.凝胶凝聚的速度与温度等关系密切,可通过调节APS和TEMED的用量,控制凝胶的聚合速度,凝胶聚合过快不利于操作。
4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作时请穿实验服并戴手套。
5.在凝胶配制过程中,应尽量避免产生气泡。
6.在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作,加水时速度不宜过快。
新品上市:明胶酶谱实验配套用的配胶试剂盒