ELISA检测试剂盒的三种检测方法
时间:2024-10-10 阅读:128
ELISA检测试剂盒的三种检测方法
1. 双抗体夹心法(Sandwich ELISA)
原理:该方法使用两个抗体,一个作为捕获抗体固定在微孔板上,另一个作为检测抗体带有酶标记。样本中的目标抗原被捕获抗体固定后,检测抗体与抗原结合,通过酶的底物反应产生可检测的信号。
操作流程:样本加入微孔板,与预包被的捕获抗体结合;加入酶标记的检测抗体,与已结合的抗原结合;加入底物,产生颜色变化,通过颜色深浅定量分析抗原含量。
2. 竞争法(Competitive ELISA)
原理:竞争法中,样本中的目标抗原与已知浓度的抗原竞争结合有限数量的抗体。样本中抗原含量越高,结合到抗体上的标记抗原就越少,产生的信号也就越弱。
操作流程:将样本和已标记的抗原同时加入含有抗体的微孔板中,让它们竞争结合抗体;洗去未结合的成分后,加入底物,通过颜色变化来定量分析样本中的抗原含量。
3. 间接法(Indirect ELISA)
原理:间接法首先使用未标记的抗体与样本中的抗原结合,然后加入酶标记的二抗(抗抗体)来识别并结合到一抗上。通过酶的底物反应产生信号,间接检测目标抗原。
操作流程:样本加入微孔板,抗原与板上的抗体结合;加入酶标记的二抗,与一抗结合;加入底物,产生颜色变化,通过颜色深浅定量分析抗原含量。
以上三种方法是ELISA检测试剂盒中常见的检测技术,每种方法都有其特定的应用场景和优势。选择哪种方法取决于检测的目的、样本类型以及所需的灵敏度和特异性。