四种常用的PCR扩增仪的区别
时间:2020-08-05 阅读:3457
PCR扩增仪,又称为PCR基因扩增仪、PCR扩增仪、聚合酶链反应扩增仪,俗称PCR仪。PCR仪实际就是一个温控设备,能在95℃,55℃,72℃之间很好地进行温度控制,广泛运用于学、生物学实验室中。
根据DNA扩增的目的和检测的标准,可以将PCR仪分为普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR仪,实时荧光定量PCR仪四类。
1、普通PCR仪
一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪称作传统PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是用于简单的、对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科学研究、教学、学临床、检验检疫等机构。
2、梯度PCR仪
一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度,通常有12种温度梯度)的PCR仪称作梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA段,其适退火温度是不同的,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出表达量高的适退火温度,进行有效的扩增。用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样节约成本的同时也节约了时间,多应用于科研、教学机构,检验、检疫等。
3、原位PCR仪
用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪称作原位PCR仪。如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,对于在分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。主要应用于临床、科研。
4、实时荧光定量PCR仪
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统的PCR仪称作荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。荧光定量PCR仪有单通道、双通道和多通道。主要用于学临床检测、生物研发、食品行业、科研院校等机构。