酒香莫贪杯，看实验人员如何检测白酒中的2A类致癌物——氨基甲酸乙酯？
时间：2022-09-28 阅读：628
氨基甲酸乙酯是化工生产中的重要原料，可作农药、医药等有机合成的中间体，也可用于合成吡咯、三唑酮和三嗪等杂环化合物。白酒生产过程中会有微量的氨基甲酸乙酯产生，由乙醇与含氮化合物反应生成，它是一种2A类致癌物，对人体健康造成危害，因此需要对白酒中的氨基甲酸乙酯进行检测。
本方案参考GB 5009.223-2014 《食品安全国家标准 食品中氨基甲酸乙酯的测定》，试样加入D5-氨基甲酸乙酯内标后，超声溶解，经过碱性硅藻土固相萃取柱净化，洗脱液浓缩、定容后用气相色谱-质谱联用仪进行测定，内标法定量。
仪器与耗材
睿科Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪
睿科Auto EVA 12 全自动定量平行浓缩仪
气相色谱-质谱联用仪：Agilent 7890A/5975C
固相萃取柱：碱性硅藻土柱，4000 mg/12 mL
试剂：正己烷、乙酸乙酯、乙·醚皆为色谱纯
Fotector Plus固相萃取仪
EVA 12 定量平行浓缩仪
样品前处理
/ 提取
样品摇匀，称取2 g样品，加入内标D5-氨基甲酸乙酯，氯化钠0.3 g，超声溶解，混匀后待净化。
/ 净化与浓缩
全自动 固相萃取仪 | Fotector Plus |
固相萃取柱 | 碱性硅藻土柱，4000 mg/12 mL |
淋洗 | 正己烷 |
洗脱 | 5%乙酸乙酯-95%乙·醚溶液 |
表1 固相萃取净化条件
将固相萃取小柱安装在仪器上，将样品溶液以0.5 mL/min速度通过固相萃取柱后，静置10 min。再加入10 mL正己烷淋洗，用5%乙酸乙酯-95%乙·醚溶液以1 mL/min~2 mL/min的流速进行洗脱并收集，将所得洗脱液置于睿科Auto EVA 12全自动氮吹浓缩仪中，可自动浓缩（红外定容）至0.5 mL左右体积，最后加入甲醇定容至1.0 mL，供GC/MS检测。详细步骤见图-1。
图-1. Fotector Plus白酒中氨基甲酸乙酯固相萃取方法
检测条件
/ 气相色谱-质谱条件
柱子 | DB-INNOWAX，30 m*0.25 mm*0.25 μm |
进样口温度 | 220 ℃ |
载气 | 高纯氦气 |
流速 | 1 mL/min |
电离模式 | 电子轰击源 |
进样方式 | 不分流进样 |
进样量 | 1 μL |
检测方式 | 选择离子扫描（SIM） |
/ 色谱图
图-2. 氨基甲酸乙酯及D5-氨基甲酸乙酯TIC图
加标测试
在2 g空白样品中加入200 ng标准品，经过上述前处理后上机，氨基甲酸乙酯的平均回收率在92.1%，RSD值为4.7%（n=4）。详细数据见表-2。
化合物 | 平均回收率 | RSD |
氨基甲酸乙酯 | 92.1% | 4.7% |
表-2 氨基甲酸乙酯基质加标平均回收率及RSD（n=4）
总结
本方法可实现净化过程全自动化，通过睿科 Fotector系列全自动固相萃取仪告别人员看守，且不需要人为添加试剂及样品；净化后的样品管可直接将样品转移至睿科Auto EVA 12全自动氮吹浓缩仪中，自动浓缩至0.5 mL，二者联用，极大节约前处理时间，提高实验效率，同时全过程的自动化也解决了手动操作不平行，易造成误差大的困扰。