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免疫球蛋白片段的制备步骤

时间:2013-08-29      阅读:610

    免疫球蛋白的抗原性,可用于免疫动物抗体相应的抗体,用于检测免疫球蛋白。五类免疫球蛋白的纯化方法可提取。如果这些免疫球蛋白分解成碎片,如FC,Fab,轻链为免疫原制备抗血清的特异性抗体,并产生较高的分辨能力。

 
制备方法包括如下步骤:
 
    分离亚基1之间的温和的条件下通过非共价键,如氢键,静电吸引连接,粘结强度弱,2种方法制备的片段断开。*种方法是改变pH值,一般pH值为3 ~ 4(羧基滴定法)和9 ~ 10(赖氨酸、酪氨酸滴定范围),当小于3或大于10亚基解离,将。该方法具有很强的变性剂如盐酸胍使用8mol/L,等。这可分离的子单元。该方法也可用于载脂蛋白抗原解离和胶原蛋白肽的提取和|教育网搜集。
 
    2个二硫键的离解两个二硫键的共价键连接,免疫球蛋白链,二硫键离解能分离的轻链和重链。氧化还原法分离方法。优势的氧化是开放的,不能再形成两个二硫键的肽纯化肽,方便;缺点是蛋氨酸氧化为亚砜,色氨酸侧链被破坏。还原法是两个二硫键还原成硫醇。但稀疏的基础是不稳定的,容易重新结合起来,形成两个二硫键,要及时用碘乙酸或碘乙酰胺羧甲基化。
硫醚侧链和蛋氨酸溴化氰溴化氰裂解蛋白3在反应,生成溴化亚氨基内酯。本产品与水反应,碎片。
 
    酶裂解酶的特异性,具有优良的方法,由不同的酶裂解不同节段。如木瓜蛋白酶抗体可裂解为Fc和Fab(×2)3片段,胃蛋白酶可以抗体溶液到F(ab')2和几个小肽,胰蛋白酶切割成不规则的。用木瓜蛋白酶酶切,抗原制备Fc段,制备血清抗链。当使用抗体的试剂,常用的F(ab胃蛋白酶切)2。
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