浅析慢病毒包装的主要流程
时间：2015-12-16 阅读：2815
慢病毒包装的主要流程：
1、慢病毒载体的构建：根据不同的研究需求构建慢病毒载体，如用于RNAi的慢病毒载体、用于基因过表达的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等；
2、慢病毒包装过程：将重组病毒质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中，收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液，在293T细胞中测定并标定病毒滴度。
慢病毒包装的注意事项：
1、在慢病毒感染细胞前，为检测病毒上清培养液内病毒的活性，并确定病毒与转染细胞之间的比率，需要确定病毒的滴度。病毒的滴度可以通过转染Hela细胞，然后使用抗体筛选稳定的细胞转染株，进行计数和数值统计。
2、在慢病毒转染细胞的过程中zui重要的一步是融合，只有一些较小的慢病毒载体才能转导进细胞，因此，病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤。
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