ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱的清洗、再生和存放
时间:2024-10-30 阅读:229
a. 清洗与再生
如果发生峰形改变、谱峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化或柱压升高,说明色谱柱可能已被污染。通常情况下,用纯有机溶剂进行冲洗(小心避免缓冲盐出现析出)就足以去除污染物。如果冲洗不能解决问题,可采用以下清洗和再生步骤。
根据样品和/或您认为污染色谱柱的物质的性质,选择与之匹配的常规清洗方法(见表4)。
请使用20倍柱体积的溶剂冲洗色谱柱。升高柱温可提高清洗效率。
如果清洗和再生之后色谱柱性能仍然很差,请致电当地的沃特世办事处获得更多支持。
表4.反相色谱柱清洗顺序
* 在使用THF或正己烷之前,确保系统与这些溶剂兼容。只有在利用纯反相有机溶剂(如乙腈)无法清洗色谱柱时,方可考虑使用诸如THF或正己烷之类的溶剂。降低流速,使用较低的操作温度并限尽量减少系统与THF和/或正己烷的接触。
** 使用低有机溶剂含量的溶液,以避免出现缓冲盐析出。
b. 存放
如果ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱需要在室温下存放超过四天,应将其保存于100%乙腈中。对于高温应用,请在使用后立即使用100%乙腈保存色谱柱,以便尽可能延长色谱柱使用寿命。切勿使用缓冲盐保存色谱柱。如果流动相中含有缓冲盐,则先用10倍柱体积(常规色谱柱体积请参见表1)的HPLC级水冲洗ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色谱柱,再用100%乙腈替换柱内的水,然后储存。如果不执行这个中间步骤,在引入100%乙腈时,色谱柱内可能会出现缓冲盐析出。将色谱柱完全密封,防止柱床因溶剂蒸发而变干。
注:如果色谱柱运行了含甲酸盐(如甲酸铵、甲酸等)的流动相,并且之后使用100%乙腈进行冲洗,那么在重新安装色谱柱并再次运行含甲酸盐的流动相时,柱平衡花费的时间可能略长。