SB-803 HQ色谱柱使用说明书
时间:2024-12-20 阅读:63
1 色谱柱规格
产品名称 | 理论塔板数 | 基 质 | 分离模式 | 排阻限 普鲁兰 | 粒径 (um) | 尺寸I.D.×L (mm) |
SB-803 HQ | 16,000 以上 | 聚羟基甲基丙 烯酸酯 | 尺寸排阻 | 1×105 | 6 | 8.0×300 |
产品名称 | 最大耐压(MPa) | 最大使用流量(mL/min) | 使用温度范围 (℃) | 使用PH 范围 | 出厂时溶剂 |
SB-803 HQ | 5.0 | 1.2 | 4~70 | 3~10 | 0.02% NaN3 aq. |
极性有机溶剂允许添加量
产品名称 | 甲醇 | 乙腈 | DMF |
SB-803 HQ | 100% | 75% | 100% |
通常使用流量:0.5~1.0 mL/min;溶剂置换时流量:<0.5 mL/min
2 使用注意事项
Ⅰ 流动相
SB-803 HQ 是水系凝胶过滤色谱柱,流动相只使用水时,样品易发生吸附。为使样品完全按照尺寸排阻法来分离,选择分析样品最适合的流动相非常关键。
1) 非离子亲水性样品及离子亲水性样品
一般使用盐溶液或缓冲液。代表性的盐及缓冲液如下表。
盐溶液 | 氯化钠、硝酸钠、硫酸钠、硫酸钾、硫酸铵 |
缓冲液 | 磷酸缓冲液、盐酸缓冲液、醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液 |
注意:①流动相的盐浓度要低于0.5M。(适合0.05~0.5M)
盐浓度在0.2M 以下时,置换流量0.5mL/min。
盐浓度在0.2~0.5M 时,置换流量0.3 mL/min。
②流动相PH3~10
③流动相含有氯离子的情况下PH 要大于6。
2) 非离子疏水性样品及离子疏水性样品
为抑制疏水性样品的疏水性吸附,流动相中添加极性有机溶剂。
离子性样品中仍需要加盐。
置换含有极性有机溶剂的流动相时,流量设定为0.5 mL/min。
3) 蛋白质样品
作为蛋白质改性剂的尿素或盐酸胍水溶液可以用作流动相。对于膜蛋白质等通常水溶液中溶解性差的样品,可以添加SDS 或者Brij-35 等界面活性剂于流动相中。
Ⅱ 注意事项
1) 色谱柱安装前,使用流动相对流路进行完全置换。
2)色谱柱在高温下使用,分析结束后首先将泵的流量设为0.5mL/min,关闭色谱柱加热开关,持续送液直至色谱柱降至室温。
在色谱柱冷却到室温前从装置中取出,色谱柱会吸入空气导致性能降低。
3)流动相使用了含有盐的水溶液,或者三天以上不使用的情况下,流路及色谱柱要置换成离子交换水。流量要求0.5mL/min 以下。
4)保护柱不仅是除去样品中的污染物来保护分析柱的,对于泵的脉动或压力变化也有一定程度的保护作用。因此尽量使用保护柱。
◎如果使用时超过了规定压力、规定流量,致使色谱柱性能降低,这是无法复原的,对此请特别注意。
3 色谱柱性能的测试方法
按照下面的条件,对色谱柱进行性能测试(详情请参考色谱柱附带的出厂检查报告COA)
色谱柱 | 流动相 | 流量 | 色谱柱温度 | 样品 | 注入量 |
SB-803 HQ | H2O | 1.0mL/min | 室温约25℃ | 乙二醇水溶液 | 5μL |
理论塔板数的计算公式