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《GB 31658.6-2021 食品安全国家标准 动物性食品中四环素类药物残留量的测定 高效液相色谱法》节选:
8.1 提取
8.1.1 皮+脂肪
取试料5g(准确至±0.02g),加二氯甲烷15mL,涡旋1min,振荡5min,加EDTA·2Na-Mcllvaine缓冲溶液15 mL,涡旋1 min,振荡5 min,8 500 r/min离心5 min,取上清液。下层溶液用EDTA•2Na-
Mcllvaine缓冲溶液重复萃取2次,每次15mL,合并上清液,中性滤纸过滤,备用。
8.1.2 肌肉、肝脏、肾脏、牛奶、鸡蛋
称取试料5 g(准确至±0.02 g),加EDTA•2Na- Mcllvaine缓冲溶液20 mL,涡旋1 min, 振荡10 min,加硫酸溶液5 mL、钨酸钠溶液5 mL,涡旋1 min,8 500 r/min离心5 min,取,上清液。残渣用
EDTA•2Na-Mcllvaine缓冲溶液20 mL、10 mL各提取2次,合并,上清液,中性滤纸过滤,备用。
8.2 净化
HLB柱依次用甲醇、水和EDTA•2Na-Mcllvaine缓冲溶液各5 mL活化。备用液过柱,待全部备用液流出后,依次用水、5%甲醇溶液各10ml.淋洗,抽干30s,用甲醇6mL洗脱,收集洗脱液于刻度试管中,加水2 mL,混匀,过甲醇5 mL、水5 mL活化的LCX柱,待全部液体流出后,用水、甲醇各5 mL淋洗,抽干1 min,草酸乙腈溶液6mL洗脱,收集洗脱液,于40℃水浴氮气吹至0.5mL~1.0mL,再加甲醇0.4mL,用草酸溶液(0.01 mol/L)稀释至2. 0 mL,微孔滤膜过滤,高效液相色谱测定(上机溶液应在24 h内完成测定)。