CUT和Tag: 新型蛋白质-DNA互作研究工具
时间：2024-06-14 阅读：672
表观遗传学研究中，在分子层面研究蛋白质与DNA之间的相互作用有助于我们更深入的理解特定细胞功能和疾病发病机制。CST为了帮助科研人员更快的获得可靠的实验结果，进一步扩大了蛋白质-DNA互作研究产品组合，重磅推出了完整的CUT&Tag（Cleavage Under Targets and Tagmentation）解决方案，包括CUT&Tag试剂盒（#77552）、 建库试剂盒（#47415）、抗体和适用于细胞以及组织的实验步骤说明书。
CUT&Tag实验步骤
对于CST CUT&Tag实验，首先将细胞与刀豆蛋白A包被的磁珠混合。洋地黄皂苷的透化处理可以让靶标特异性的一抗进入细胞并结合目的蛋白。由于需要将信号放大，因此还要添加二抗。随后进行预装接头的高活性CUT&Tag pAG-Tn5 (Loaded) （#79561）融合转座酶的孵育，转座酶进入细胞后可以通过pAG结构域与二抗结合，这样就使转座酶与靶标蛋白间接联系起来。加入Mg2+激活转座酶活性后，目标基因组 DNA 会被切割并就地连接接头 DNA，最后进行DNA纯化和PCR扩增。由于省去了体外接头连接步骤，CUT&Tag可以节省您宝贵的时间，让您在更短的时间内进行蛋白质-DNA相互作用研究。
图1：CUT&Tag 实验原理
CUT&Tag为何与众不同？
虽然ChIP仍然是研究蛋白质-DNA相互作用的主要方法，但随着新的研究工具的出现，例如CUT&RUN以及CUT&Tag，传统ChIP-Seq实验需要大量样品，重复性差、高背景等问题得到了解决。CST CUT&Tag试剂盒（#77552）经过了严格验证，适用于细胞和组织样品中多种靶标类型，并包含了阳性对照抗体Tri-Mmethyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751和阴性对照抗体Normal Rabbit IgG #2729 / Normal Mouse IgG #68860，以及抗兔和抗鼠的二抗。同时，当样品量不足时，该试剂盒还可以帮助您更快获得实验结果，节省测序成本，并使单细胞染色质分析成为可能。
图2：CUT&Tag优势
此外，CST还专门针对CUT&Tag验证了多种一抗，包括组蛋白靶标和部分非组蛋白靶标，以确保实验结果的可重复性和可靠性。
CUT&Tag 试剂为您提供高质量数据
一、组蛋白修饰分析
1、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751对HCT 116细胞进行CUT&Tag实验。
2、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751对低细胞数量的NCCIT细胞进行CUT&Tag实验。
二、转录因子和辅因子分析
1、使用Nanog (D2A3) XP Rabbit mAb (Mouse Specific) #8822对F9细胞进行CUT&Tag实验。
2、使用 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb #13594 对NCCIT细胞进行CUT&Tag实验。
3、使用ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb #11815对低细胞数量的Hep G2细胞进行CUT&Tag实验。
三、组织样品分析
1、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751对小鼠脑组织进行CUT&Tag实验。
2、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751对小鼠肝组织进行CUT&Tag实验。
3、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751对小鼠心脏组织进行CUT&Tag实验。
CST经过严格验证的一站式CUT&Tag解决方案现已全面上线：CUT&Tag试剂盒（#77552） + 一抗和二抗 + 建库试剂盒（#47415）
CUT&Tag试剂盒和试剂
| 货号 | 产品名称 | 规格 |
| 77552 | CUT&Tag Assay Kit | 1 kit |
| 79561 | CUT&Tag pAG-Tn5 (Loaded) | 100ul |
| 47415 | CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems | 1 kit |
| 63228 | CUT&Tag PCR Master Mix | 840ul |
部分CUT&Tag验证抗体列表
| 货号 | 品名 |
| 8173 | Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) Xpe Rabbit mAb |
| 9649 | Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb |
| 52885 | Anti-mouse secondary Ab |
| 35401 | Anti-rabbit secondary Ab |
| 11815 | ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb |
| 6964 | Bmi1 (D20B7) Xe Rabbit mAb |
| 5856 | Bmi1 (D42B3) Rabbit mAb |
| 25069 | CBX2 (EЗN6A) Rabbit mAb |
| 14696 | CBX8 (D208C) Rabbit mAb |
| 3418 | CTCF (D31H2) Xpe Rabbit mAb |
| 9725 | Di-Methyl-Histone H3 (Lys4)(C64G9) Rabbit mAb |
| 4658 | Di-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D85B4) Xp® Rabbit mAb |
| 32578 | DNMT3A(D2H4B) Rabbit mAb |
| 57868 | DNMTЗB (E8A8A) xpe Rabbit mAb |
| 85322 | EED (E4L6E) XP® Rabbit mAb |
| 5246 | Ezh2 (D2C9) XP³ Rabbit mAb |
| 5851 | GATA-6 (D61E4) Xp® Rabbit mAb |
| 42427 | Helios (D8W4X) XP³ Rabbit mAb |
| 13594 | JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb |
| 97800 | MITF (D3B4T)Rabbit mAb |
| 14689 | MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) |
| 14111 | Mono-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D9J1D) Rabbit mAb |
| 5326 | Mono-MethylHistone H3 (Lys4) (D1A9) Xp® Rabbit mAb |
| 5232 | Nanog (D73G4} XP® Rabbit mAb (ChiP Formulated) |
| 68860 | Normal Mouse lgG |
| 13499 | Phospho-Rpb1 cTD (Ser2) (E1Z3G) Rabbit mAb |
| 13546 | Phospho-Rpb1 cTD (ser2/ser5) (D1G3K) Rabbit mAb |
| 2729 | Rabbit lgG |
| 2629 | Rpb1 CTD (4H8) Mouse mAb |
| 11956 | SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb |
| 2569 | TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb |
| 9733 | Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb |
| 9751 | Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb |
| 5737 | Tri-Methyl-Histone H4 (Lys20)(D84D2) Rabbit mAb |
| 8240 | ubiquityi-Histone H2A (Lys119} (D27C4) Xpe Rabbit mAb |
部分相关产品
| 货号 | 产品 | 应用 |
| 56383S | SimpleChIP® Plus Sonication Chromatin IP Kit | 超声法，磁珠，可应用于ChIP,ChIP-seq |
| 9005S | SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) | 酶解法，磁珠，可应用于ChIP,ChIP-seq |
| 9004S | SimpleChIP® Plus Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads) | 酶解法，琼脂糖珠，可应用于ChIP |
| 9003S | SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Magnetic Beads) | 酶解法，磁珠,可应用于ChIP,ChIP-seq |
| 9002S | SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kit (Agarose Beads) | 酶解法，琼脂糖珠，可应用于ChIP |
| abs50034 | 染色质免疫共沉淀（ChIP）试剂盒 | 蛋白 A/G 磁珠，超声法，，可应用于ChIP,ChIP-seq |
| 86652 | CUT&RUN Assay Kit | CUT&RUN |
| 40366 | CUT&RUN pAG-MNase and Spike-In DNA | CUT&RUN |
| 48105 | CUT&RUN 4X Stop Buffer | CUT&RUN |
| 42015 | CUT&RUN DNA Extraction Buffer | CUT&RUN |
| 15338 | Antibody Binding Buffer (CUT&RUN, CUT&Tag) | CUT&RUN, CUT&Tag |
| 31415 | 10X Wash Buffer (CUT&RUN, CUT&Tag) | CUT&RUN, CUT&Tag |
| 14209 | DNA Purification Buffers and Spin Columns (ChIP, CUT&RUN, CUT&Tag) | ChIP, CUT&RUN, CUT&Tag |
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