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waters色谱柱供应商讲解色谱柱常见毛病

时间:2016-03-25      阅读:3060

waters色谱柱供应商讲解色谱柱常见毛病
   1.柱压过高
     为什么柱压会过高?
     1)微粒堵塞(样品、流动相、密封垫)
     2)柱床膨胀
     3)不可逆吸附
     4)细菌生长

   2.柱效低
     为什么柱效低?
     1)色谱柱被污染
     2)过滤片部分堵塞(样品、流动相或密封垫的细小颗粒造成的堵塞)
     3)色谱柱内的死体积

   3.色谱柱维修/再生——物理阻塞
     1)在安装柱前后测试压力差
     2)如果柱压太高,反装色谱柱,并用10-20倍体积的流动相冲洗色谱柱,监测压力变化
     3)若出现衬垫(如:蛋白凝聚、细胞物、聚合物)设法用相应的可溶性溶剂
     4)若仍无效,应考虑更换滤片
     5)柱头有塌陷,用填料修补

   4.实验的重复性差
     1)色谱柱被污染
     2)流动相pH值及组成不合适造成键合相流失
     3)样品溶剂不同或样品本身不稳定

   5.回收率低,不出峰
     1)“不可逆”吸附
     2)固定相过强或流动相过弱
     3)非特异性吸附

   6.色谱柱以外的因素
     1)“柱效”问题,不一定是色谱柱问题
     2)仪器问题:连接不好造成死体积
     3)流动相问题:色谱柱未平衡好
     4)进样量太大
     5)不同公司产品,其接头不同。处理不当时,会造成:色谱峰展宽(死体积)使柱效下降或渗漏。解决方法:自制相应的转换接头;使用“通用型”接头(椎箍及螺母)
     6)系统反压问题:
       阻尼器堵塞
       进样器堵塞
       管路或连接口堵塞
       在线过滤器不干净
       保护柱
     7)压力传感器不准确
     8)流速是否错误

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