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浅析热电核磁共振波谱仪的五个操作步骤

时间:2022-11-24      阅读:415

  热电核磁共振波谱仪来源于原子核能级间的跃迁。只有置于强磁场中的某些原子核才会发生能级分裂,当吸收的辐射能量与核能级差相等时,就发生能级跃迁而产生信号。
  用一定频率的电磁波对样品进行照射,可使特定化学结构环境中的原子核实现共振跃迁,在照射扫描中记录发生共振时的信号位置和强度,就得到核磁共振谱。共振信号位置反映样品分子的局部结构(如官能团,分子构象等),信号强度则往往与有关原子核在样品中存在的量有关。
  热电核磁共振波谱仪是能够在原子分辨率下测定溶液中生物大分子三维结构的方法,在研究蛋白质和氨基酸的结构、动力学以及蛋白质相互作用等方面发挥着重要作用,利用核磁谱研究蛋白质,已经成为结构生物学领域的一项重要技术手段。依据不同食品的特定参考标准,在食品品质鉴定方面也得到有效应用,包括鉴别果蔬和谷物在生长过程中及采摘后的内部品质、成熟度、内部缺陷等,以及肉类、酒类、油脂类食品的原产地和品质优劣等。
  热电核磁共振波谱仪的操作步骤:
  1、放置样品
  首先要有足够的样品量,一般300兆核磁共振测氢谱需2-10mg,500兆核磁共振测氢谱需0、5mg以上,碳谱需要的样品量更大。选择适当核磁共振的溶解,使样品*解。如果用5mm的核磁管,氘代试剂的量要使液面高度在3cm以上。
  然后核磁管插入转子放入量尺量深到底;若溶液高度不能盖满量尺的黑色标线,可稍提核磁管,使溶液中间位置与量尺中间刻度一致。
  将带有转子的核磁管小心放入充满气流的磁铁入口,"down"下。核磁管的旋转可以消除磁场在XY方向的不均匀度,提高分辨率。
  2、核磁共振锁场
  按锁场钮,利用氘代试剂氘信号,使锁场单元工作,锁住磁场。锁场的目的使为了使磁场稳定。
  3、核磁共振调节匀场
  在操作键盘上标有X、Y、Z、XY、X2-Y2和Z3等字母,表示一阶、二阶、三阶的不同方向磁场的均匀度。
  调节匀场时,一般先调节Z1、Z2、Z3和Z4,然后调节X、Y方向。匀场的目的是找到各方向之间配合的*位置。另外,各高阶按钮在仪器验收时已经调好,平时不要随便调试,否则一旦调乱,很难找到*配合。
  4、核磁共振探头调谐
  为了获得zui高的灵敏度,要进行探头调谐。通过反复的调谐和匹配,使接收到的功率zui大,反射的功率zui小。
  5、核磁共振数据的采集与处理
  输入采集命令及可开始采样。采样结果为FID信号,即时域谱;傅立叶变换,将时域谱变成频域谱。然后进行相位纠正使峰型对称,基线校正使基线平滑,域值线以上的峰标出化学位移,予以积分(注意区分氘代试剂溶剂峰及杂质峰)。
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