别错了!BD 762165 Paxgene血液RNA管是这样用
时间:2023-10-19 阅读:473
PAXgene血液RNA管旨在立即稳定细胞内RNA,从而产生准确且可重复的基因表达数据。PAXgene血液RNA管含有一种专有试剂,可在采集后立即稳定细胞内RNA。细胞内RNA在室温下稳定长达三天或在2-8°C下稳定长达五天。PAXgene试管可以在-20°C至-70°C的温度下冷冻,以便长期储存。
BD 762165 Paxgene血液RNA管使用方法:
1.将0.2-1.5mL新鲜或解冻后的抗凝全血加入到1.5mL塑料离心管中。
2.12,000rpm室温离心3分钟,弃上清(血浆)。如果此时血液细胞沉淀体积大于0.2mL,则需要减少血液的使用量,具体减少量需根据具体情况决定,因为各个个体(尤其是患者)血液中白细胞数目差别很大。
3.将1mL溶液A加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4.将0.3mL的溶液B加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
5.和0.2mL氯仿加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
6.12,000rpm室温离心3-5分钟,将上清液(为无色或浅红色,约0.5-0.9mL)转移到另一干净离心管中。为防止污染,建议留100uL左右的上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
7.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自备氯仿,用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
8.室温12,000rpm离心3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
9.将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
10.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D,用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
BD全血RNA管762165具有下列特点:
◆ 体外诊断使用,具有CE-IVD标志,符合欧盟98/79/EC 指令
◆ 整合的系统,用于采集、稳定和纯化胞内RNA
◆ 提供在分析工作进行之前的样本标准化处理
◆ 在 18~25℃下,RNA稳定可长达3天
◆ 在-20℃ 或 -70℃条件下至少稳定50个月
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