整理汇总比较热门的人间充质干细胞无血清培养基。

MSC人间充质干细胞无血清培养基

——广泛使用的几种人间充干细胞无血清培养基

人间充质干细胞培养一开始使用基础培养基（DMEM，DMEM-F12等）配比牛血清的*培养基，因为牛血清作为异源物，可能会带来病原体污染，此后有使用人血清、血小板裂解液和脐带血清等作为替代，虽然也不能*免除威胁。血清和这些替代品还有一个缺点，都是天然产物，批次间并不稳定，不利于研究和临床应用所需的一致性。

随着脐带华通氏胶MSC等各种间充质干细胞的发现，间充质干细胞能大量获得，MSC治疗发展后，培养基批次稳定、没有污染是必要条件，商用的无血清培养基因而成为*选择。

StemPro® MSC SFM无血清间充质干细胞培养基

产品英文名称： CTS™ StemPro™ MSC SFM

产品中文名称：StemPro™无血清间充质干细胞培养基

Gibco CTS™ StemPro™间充质干细胞培养基是无血清培养基，专为人间充质干细胞设计，相对于传统的血清培养基，能显著增强人间充质干细胞的扩增和一致性。使用该培养基人间充质干细胞可以扩展到5个形态，同时仍然保持他们的三系中胚层分化潜能(即:可分化成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞)。每一批培养基用人间充质干细胞测试都合格；而且用血清培养基培养的人间充质干细胞可以转移到StemPro™无血清间充质干细胞进行培养，不需要或者只需要很短的适应期。此外，该培养基还可以可以直接培养人类骨髓中的间充质干细胞。

MesenCult™人间充质干细胞培养基

产品英文名称： MesenCult™-XF Medium，Defined, xeno-free medium for human mesenchymal stem cells

产品中文名称：MesenCult™人间充质干细胞培养基

产品概述 MesenCult™-XF培养基是一款标准的，无异种成份，无血清培养基，设计用于人间充质干细胞（MSCs）培养。MesenCult™-XF Medium优化用于体外扩增间充质干细胞和使用集落形成单位-成纤维细胞（CFU-F）的细胞计数。MesenCult™-XF支持MSCs细胞长期生长和维护细胞多分化潜能。MesenCult™-XF Medium要与MesenCult™-XF Attachment Medium（#05424）和MesenCult™-ACF Dissociation Kit （#05426）一起使用。MesenCult™-XF Attachment Substrate 和 MesenCult™-ACF Dissociation Kit培养基成份经过筛分测试，在与MesenCult™-XF Medium一起使用时可提供*细胞贴附。MesenCult™-XF Medium使用时必需添加L-谷氨酰胺。

推荐应用：

• 人骨髓中分离的间充质干细胞的细胞增殖

• 间充质干细胞的长期培养（8代以上）

• 人骨髓分离的CFU-F和培养扩增的间充质干细胞的细胞检测和计数

MesenGro人间充质干细胞培养基

产品英文名称： StemRD MesenGro® Chemically Defined Medium for MSC

产品中文名称：StemRD人间充质干细胞培养基

StemRD人间充质干细胞培养基用于从骨髓、脐带血或脂肪组织中提取的人间充质干细胞的培养。StemRD人间充质干细胞培养基的原料来源是化学重组合成和纯化得到。StemRD人间充质干细胞培养基是无异源性的因为没有一种成分直接来自于非人类动物。

Lonza MSCGM-CD™  BulletKit 间充质干细胞培养基

产品英文名称： TheraPEAK Chemically Defined Mesenchymal Stem Cell Growth Medium

产品中文名称：人间充质干细胞培养基

Lonza MSCGM-CD™ 人间充质干细胞培养基是无血清培养基，专为人间充质干细胞设计，相对于传统的血清培养基，能显著增强人间充质干细胞的扩增和一致性。使用该培养基人间充质干细胞可以扩展到5个形态，同时仍然保持他们的三系中胚层分化潜能(即:可分化成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞)。此外，该培养基还可以可以直接培养人类骨髓中的间充质干细胞。

LONZA 还有一款适合多种细胞类型的通用型无血清培养基，用来培养间充质干细胞市场反馈较好。

LONZA UltraCULTURE^TM Serum-free Medium是一种通用型无血清培养基，适用于培养贴壁和悬浮的哺乳动物细胞。适于在疫苗生产中制备病毒颗粒；支持杂交瘤形成时的细胞融合，支持单核细胞、巨噬细胞、上皮细胞和成纤维细胞系的细胞生长。适合多种细胞类型的无血清培养，包括HeLa、HEC、N-10、HNK、MB231等细胞。

Stemgro®  hMSC Mediu人间充质干细胞培养基

产品英文名称： Corning® stemgro® hMSC Medium

产品中文名称：康宁人间充质干细胞培养基

Corning® Stemgro®是一种无血清、无异种蛋白、化学成分明确的人间充质干细胞培养基。

更多间充质干细胞培养产品欢迎您咨询重庆市华雅干细胞技术有限公司。重庆市华雅干细胞技术有限公司以“专注干细胞研究，提升干细胞品质”为发展理念，专业从事干细胞基础研究、干细胞再生医学临床应用研究及干细胞技术服务。

推荐 HY StemCell 人间充质干细胞无血清培养基

中文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人间充质干细胞无血清培养基

英文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM  Human MSCs Growth Medium

华雅干细胞开发的HY StemCell CCGmHum^TM 人间充质干细胞无血清培养基是成分确定、无血清、无动物源，无需铺板胶的*培养基。适用脐带或脂肪来源的人间充质干细胞的原代培养扩增。培养的hMSC可传多代。细胞因子添加物中含有多种细胞生长因子、粘附蛋白、转铁蛋白、胰岛素、微量元素和人白蛋白等成分。

附录 三种zui热门人间充质干细无血清培养基的比较StemPro MSC SFM MesenCult MSCGM-CD

1 StemPro MSC SFM 人间充质干细胞无血清培养基

是间充质干细胞的*种商用无血清培养基，而且已经被FDA批准作为医疗产品使用。

StemPro " MSC SFM"谷歌学术有250多篇。

“bone marrow”来源的间充质干细胞有200多篇。

“Adipose”脂肪来源的间充质干细胞有近200篇。

“umbilical cord”脐带来源的间充质干细胞有近150篇。

2 StemCell MesenCult 人间充质干细胞无血清培养基

标准、无异源、无血清培养基，人间充质干细胞。

适用：骨髓来源的人间充质干细胞

CFU-F 分析

谷歌学术 Mesencult-XF有160多篇，2017有20多篇。

Mesencult有1000多篇。

Mesencult-XF+

骨髓来源的间充质干细胞 近140篇

脂肪来源的间充质干细胞 约100篇

脐带来源的间充质干细胞 约100篇

3 LONZA TheraPEAK™ MSCGM-CD™ 人间充质干细胞无血清培养基

基本特点：无血清，成分确定，各种类型的间充质干细胞扩增培养。

另外声称细胞从有血清的培养基转出来可以直接换LONZA的，不需要额外驯化。

MSCGM-CD是 Mesenchymal Stem Cell Growth Medium，Chemically Defined的缩写，是LONZA的间充质干细胞无血清培养基的特定品牌。

用MSCGM-CD在谷歌学术上能搜到约100篇文献。2017年就有20多篇。

再看下间充质干细胞来源三大帮各有多少篇：

骨髓来源的间充质干细胞 约80篇

脂肪来源的间充质干细胞 约60篇

脐带来源的间充质干细胞 约60篇

过程中发现牙周膜间充质干细胞也蛮多的，有40多篇。

背景知识 不同来源的人间充质干细胞的分离及血清培养

人间充质干细胞的不同来源

人类骨髓来源间充质干细胞

新生儿脐带来源间充质干细胞

新生儿脐带血来源间充质干细胞

人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞

人类脂肪来源间充质干细胞

人类羊水来源间充质干细胞

人类牙髓来源间充质干细胞

人类皮肤来源间充质干细胞

新生儿胎盘来源间充质干细胞

人类唾液腺来源间充质干细胞

人类滑膜来源间充质干细胞

1 人类骨髓来源间充质干细胞

密度梯度离心骨髓，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类骨髓来源间充质干细胞分离

Ficoll密度梯度离心

人类骨髓来源间充质干细胞原代及传代培养

Knock out DMEM，DMEM+10%FBS

2 新生儿脐带来源间充质干细胞 新生儿脐带血来源间充质干细胞

组织块培养法、密度梯度离心法等处理脐带、脐带血，贴壁法原代培养间充质干细胞。

新生儿脐带来源间充质干细胞 新生儿脐带血来源间充质干细胞分离

Ficoll-Hypaque 密度梯度离心，酶消化法（0.25% 胰蛋白酶-EDTA），组织块培养法

新生儿脐带来源间充质干细胞 新生儿脐带血来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM+10%FBS，10%FCS，MSCGM+10%FCS

3人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞

组织块培养法、酶消化法处理华通氏胶，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞分离

组织块培养法, 酶消化法 (0.1% 胶原酶II,1 mg/ml 胶原酶B+胰蛋白酶, 胶原酶 +hyaluronidase +胰蛋白酶,胰蛋白酶-EDTA, 0.26% 胶原酶I+ 0.07% hyaluronidase+0.125% 胰蛋白酶)

人类脐带华通氏胶来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM/DMEM-F12 + 10% FBS

4 人类脂肪来源间充质干细胞

酶消化法处理脂肪组织，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类脂肪来源间充质干细胞分离

酶消化法(1.5 mg/ml 胶原酶 I, 1 mg/ml 胶原酶-I in 0.1% BSA)

人类脂肪来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM-Low Glucose+MCDB201+ 2% FCS,DMEM+ 20% FBS,MesenproRS

5 人类羊水来源间充质干细胞

密度梯度离心、酶消化法处理羊水，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类羊水来源间充质干细胞分离

密度梯度离心,酶消化法 (0.25% 胰蛋白酶 +1.2 units/ml of dispase + 2 mg/ml 胶原酶I）

人类羊水来源间充质干细胞原代及传代培养

a-MEM + 20% FBS, DMEMF12 + 10% FBS, high glucose DMEM + 20% hESC-defined FBS, KSR-based 培养基

6 人类牙髓来源间充质干细胞

酶消化法处理牙髓，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类牙髓来源间充质干细胞分离

酶法 (387.1 U/+mg 胶原酶+ 0.70 U/mg dispase II)

人类牙髓来源间充质干细胞原代及传代培养

D-MEM-F12, a-MEM + 2% FCS

7 人类皮肤来源间充质干细胞

酶消化法处理皮肤组织，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类皮肤来源间充质干细胞分离

酶消化法 (0.6 U/ml dispase, 0.62 Wunsch U/ml Liberase Blendzyme 1,1.25 mg/ml 胶原酶 I)

人类皮肤来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM-F12 1 10/5/0.5% FBS, DMEM + 20% FBS

8 新生儿胎盘来源间充质干细胞

Ficoll 密度梯度离心、酶消化法处理胎盘，贴壁法原代培养间充质干细胞。

新生儿胎盘来源间充质干细胞分离

Ficoll 密度梯度离心, 酶消化法(1 mg/ml Dispase, 300 U/ml 胶原酶, 100 U/ml Hyalluronidase,

80 U/ml DNAse I, 0.25% 胰蛋白酶-EDTA)

新生儿胎盘来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM 低糖 + 20% FBS

9 人类唾液腺来源间充质干细胞

酶消化法处理唾液腺，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类唾液腺来源间充质干细胞分离

酶消化 (1.67 mg/ml 胶原酶+ 1.33 mg/ml hyaluronidase, 1.67 mg/ml dispase; 5.01 mg/ml 胶原酶2 + 3.99 mg/ml hyaluronidase,33.4 mg/ml dispase)

人类唾液腺来源间充质干细胞原代及传代培养

DMEM + 10% FCS, DMEMF12 + 3% FBS

10 人类滑膜来源间充质干细胞

Ficoll–Paque 密度梯度离心、酶消化法处理滑膜，贴壁法原代培养间充质干细胞。

人类滑膜来源间充质干细胞分离

Ficoll–Paque 密度梯度离心, 酶消化法 (3mg/ml 胶原酶V)

人类滑膜来源间充质干细胞原代及传代培养

a-MEM + 10% FBS, 20% FBS

小结：

不同来源的人间充质干细胞的分离方法：Ficoll–Paque 密度梯度离心、酶消化法、组织块培养法

不同来源的人间充质干细胞的培养方法：不同的基础培养基配比不同比例的胎牛血清。

名词解释

MSC SFM mesenchymal stem cell serum-free medium，间充质干细胞无血清培养基

Ficoll密度梯度离心 常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.001 的聚蔗糖(Ficoll)-泛影葡胺(Urografin)(F／H)分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，平均分子量为400,000，当密度为1.2g／ml仍未超出正常生理性渗透压,也不穿过生物膜。红细胞、粒细胞比重大，离心后沉于管底；淋巴细胞和单核细胞的比重小于或等于分层液比重，离心后漂浮于分层液的液面上，也可有少部分细胞悬浮在分层液中。吸取分层液液面的细胞，就可从外周血中分离到单个核细胞。Ficoll-Paque 分离液适用血液、骨髓和脐带血来源的人单个核细胞分离（包括间充质干细胞）。

DMEM Dulbecco's Modified Eagle Medium是一种广泛使用的基础培养基，可用于支持很多种类的哺乳动物细胞生长。

组织块培养法 组织切成小块，接种培养器皿培养细胞。

酶消化法 用胰蛋白酶和胶原酶等消化组织块，分离细胞进行培养。

胶原酶 是一种蛋白酶，它能够特异性的结合 Pro-X-Glyc-Pro序列中，中性氨基酸（X）和甘氨酸之间的肽键。该序列高频率的存在于胶原中。胶原酶是*的一种可以降解广泛存在于结缔组织中的具有三股螺旋的天然胶原纤维的蛋白酶。

Hyaluronidase 透明质酸酶

Dispase 分散酶

DNAse 脱氧核糖核酸酶

相关产品

Ficoll 密度梯度分离液 Ficoll-Paque PREMIUM改良于Ficoll-Paque PLUS，后者作为一种从骨髓、外周血和脐带血中高得率分离单个核细胞的无菌密度梯度介质已应用了三十多年。与Ficoll-Paque PLUS不同的是，Ficoll-Paque PREMIUM的生产是在严格控制环境下完成的, 生产条件符合ISO 13485:2003标准，GMP认证和美国药典的建议，可用于生产细胞治疗相关产品。细胞毒性等级为0。有RSF文件。

胶原酶 I 型胶原酶从溶组织梭菌制备，用于细胞和组织的解离。

间充质干细胞基础培养基 Gibco MEM-α无酚红基础培养基可用于多种悬浮和贴壁的哺乳动物细胞，包括角化细胞、原代大鼠星形胶质细胞和人黑色素瘤细胞。

Gibco MEM-α谷氨酰胺基础培养基广泛用于哺乳动物细胞培养以及DHFR阴性转染细胞选择。

参考文献

1 Dolly Mushahary, et al. Isolation, C*tion, and Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells.2017

2 人类间充质干细胞库建设与管理规范，SZDB/Z 126-2015

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