NK细胞活化扩增方法,Corning版
时间:2018-02-08 阅读:2048
NK 细胞活化
- 热灭活自体血浆,56°C,30min。离心, 800 xg , 20 min,去除沉淀。4°C 保存上清血浆,培养备用。
- 至少5倍体积的PBS(不含钙镁)清洗PBMCs。室温离心500xg,10min,收集PBMCs。 PBMCs稀释到 1 x 106 cells/mL,使用NK活化培养基配比1.8mL NK活化添加剂和10%自体血浆。
- 预包被T-75培养瓶使用前,用PBS(不含钙镁)清洗两次。添加30 mL PBMC悬液到预包被T-75培养瓶,37°C,5% CO2培养。
注意:第六天之前,如果培养基变黄,细胞密度超过2.0 x 106 cells/mL,需要添加新鲜的NK活化培养基配比10%自体血浆,保持细胞密度在在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之间。
NK细胞扩增
- 培养第六天,培养液离心,适量NK扩增培养基(1000 IU/mL IL-2 和10%自体血浆)重悬细胞,再转移到T-225培养瓶或透气细胞培养袋。
- 每隔两三天,根据细胞扩增状态,培养体系中添加新鲜的NK扩增培养基(1000 IU/mL IL-2 和10%自体血浆)保持细胞密度在5 x 105到 2.0 x 106 cells/mL之间。
- 细胞总量到达2 x 109 后收获细胞用于CCK8 杀伤力和免疫表型检测。
注意:整个实验过程中,细胞悬液吹打和培养容器拍打都要轻柔,以避免细胞损伤,保持细胞活性。
Corning® NK细胞活化扩增培养套装
英文名:Corning® NK Expansion Kit
中文名:Corning® NK细胞活化/扩增培养套装
应用:NK细胞活化扩增
品牌产地:美国Corning
保存:2°C - 8°C
NK细胞是当今免疫治疗常用的细胞。但是NK细胞培养操作难度大,对培养条件、培养技术要求很高,难以获得高纯度能的活性细胞。 Corning NK细胞活化/扩增培养基套装由多个组分组成,为 NK细胞培养提供简便的操作方案。使用该套装所获得细胞数量产量高,活性高,具有很高的杀伤效应。
产品组成
NK细胞活化培养基
NK细胞活化添加剂
NK细胞扩增培养基
抗体预包被T75细胞培养瓶
细胞培养袋
产品特色
扩增能力强,在14天内可达到100倍扩增
效应细胞比例高,可达80%
操作方便
产品订购信息
品牌 | 货号 | 产品描述 | 包装 |
Corning | 88-570-kit | NK Kit for activation and expansion of human natural killer cells NK细胞活化/扩增培养基套装 | 1Kit |
套装包含 | 活化用 | Pre-coated T-75 flask 抗体预包被T75细胞培养瓶 | 1瓶 |
NK primary medium NK细胞活化培养基 | 1×50 mL | ||
NK primary supplement NK细胞活化添加剂 | 1×1.8 mL | ||
扩增用 | Expansion medium NK细胞扩增培养基 | 1×1000 mL | |
配件 | 细胞培养袋 | 1 x 640 cm2 |