阳离子聚合物--聚乙烯亚胺（polyethyleminine，PEI)

聚乙烯亚胺是目前研究的阳离子聚合物非病毒基因载体，它是由单体(-CH,CH,-NH-)构成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基团的水溶性聚合物。PEI单体中每3个原子含1个氮，并构成同的胺基。这些胺基的pKa值不同，使 PEI在较宽的pH范围均可以被质子化,这是PEI有较强的结合DNA附细胞并作为基因转导载体的重要原因。

 分子量是决定其转染效率重要因素，高分子量的PEI具有高效的基因转染效率，但因为其大量正电荷的存在以及非生物降解性，可以导致细胞膜去稳定化，显示出较大的细胞毒性，低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低，但基因转染效率也随之降低。在HeLa、COS7、293T和CHO四种细胞上评价交联PEI作为基因载体体外转染pGL3的效率。发现二硫键含量和PEI分子量大小决定了转染效率。

不同分子量的PEI转染效率不同

枝状的 800 kD PEI 是*报道的可用于多种细胞转染的试剂，枝状的 25 kD PEI（25B）用HEK293 细胞大规模瞬时转染，其转染效率较枝状2 kD、600 kD、800 kD 或线状 22 kDPEI（22L）的高。

有研究报道，比较了 3 种商品化的 PEI 转染试剂 25 kD LPEI、40 kDPEI-Max、PEI pro，转染 HEK293 和 CHO 细胞，PEI pro 的转染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max，PEI pro 的毒性。经过优化，PEI-Max 的表达量优于 25 kD LPEI。

PEI 介导的瞬时转染中 DNA 和 PEI 比例一般为1:2 ~ 1:3（W/W），提高转染试剂比例会提高转染效率，但是随之细胞毒性也会增加。另外转染时的细胞密度、DNA-PEI聚合物的大小、培养基的组成等都会影响转染效果。

阳离子聚合物--脂质体 

阳离子脂质体易穿透细胞膜，转染效率要明显高于其他转染试剂，因而也广泛用于瞬时转染，但因其化学合成不易，商业化常用的脂质体如 Lipofectamine 价格较高，远贵于其他化学转染试剂，因此只适合于小量瞬时转染。

目前的脂质体转染体系是将阳离子脂质体与 DNA 溶液混合，以形成 DNA 夹在脂质双分子层之间的结构。HEK293 细胞是非常适合进行瞬时转染的细胞，很容易接收外来 DNA，在合适的转染条件下，脂质体转染效率可达 80% 以上， 使用商品化罗氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的转染效率甚至可达90% 以上。但是传统的 CHO 细胞的转染效率相对较低，只有 40% ~ 60%。

 Thermo Fisher 公司新开发的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬时转染系统的转染效率和表达量有了较大的提升，但是商品化的转染试剂盒培养基价格较贵，不太适用于产业化放大。

因此，目前PEI转染试剂，价格实惠深受广大科研伙伴的热爱。重点是超级便宜！！！便宜到什么程度呢？偷偷告诉你：据说一次可配1L的量！1L？？天啊，怎么能用的完？如此便宜实惠的转染试剂该如何操作呢？

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