关于胶原酶配置后的保存方法
时间:2020-10-24 阅读:7511
关于胶原酶的配制和保存:
1.配制的缓冲液:胶原酶应该用氏液来配。不能用三蒸水因为渗透压太低细胞不能耐受,也不能用培养液因为其中的成分复杂对消化有影响,*也不用氏液因为Ca2+Mg2+离子易与一些成分结合形成沉淀影响分离(但这是理论上,我曾经试过结果也还不错),PBS文献上没见过,但应该理论上可以用的
2.配制的方法:
书上是36.5摄氏度搅拌溶解2h;4摄氏度过夜;0.22um过滤除菌;
但网上有人的方法是:室温下直接溶,好溶,溶完直接0.22um过滤除菌,据说也可行;
3.配制的浓度:1mg/ml、0.1-0.5%、0.025%(不同组织采用不同浓度)
4.配置后保存方法:
有的人推荐现用现配;
4度存放,*1~2周内用完;
长时间贮存宜在-20摄氏度,用前可放37度溶解,但溶解时间不能过久,防止酶活性受影响;
5.消化组织时间:取决于消化液浓度和组织类型,一般消化时间为2-3小时或者4度过夜
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